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目的:通过检测红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的增殖生长、细胞凋亡、细胞周期及运动侵袭的影响,探讨红景天苷抗人乳腺癌的作用和机制;通过蛋白质组学方法,以人乳腺癌MDA-MB-435细胞为对象,筛查红景天苷干预所致的差异表达蛋白质,为后续研究红景天苷参与治疗乳腺癌的分子机制提供初步依据。方法:体外培养人乳腺癌MDA-MB-435细胞。用CCK8比色法,以10倍梯度浓度(0.01mg/ml、0.1mg/ml、1mg/ml、10mg/ml、100mg/ml)的红景天苷作用MDA-MB-435细胞24h,筛查并计算红景天苷对MDA-MB-435细胞的半数有效抑制浓度(IC50)。以不加红景天苷组为对照组,以IC50浓度的红景天苷作用组为实验组,分别作用于MDA-MB-435细胞24h、48h和72h,检测红景天苷对MDA-MB-435细胞增殖的影响,在光镜下观察其形态改变;分别用流式细胞术检测红景天苷对细胞凋亡和细胞周期的影响;用Transwell小室模型观察红景天苷干预后MDA-MB-435细胞运动和侵袭能力的改变;用双向电泳、软件分析和质谱等常用蛋白质组学技术研究红景天苷对MDA-MB-435细胞蛋白质表达谱的影响。结果:筛查并计算得出红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的IC50为4mg/ml。CCK8比色法显示红景天苷组在作用24h、48h和72h三个时间点均能抑制MDA-MB-435细胞的生长增殖,抑制率均高于对照组,且具有显著的时间-效应依赖性(P<0.05)。流式细胞术显示:红景天苷组早期凋亡率(3.31±0.21)%、晚期凋亡和坏死率(28.80±2.15)%,高于对照组(1.26±0.13)%(P<0.05)和(5.56±0.78)%(P<0.01)。细胞周期检测发现红景天苷组细胞较对照组在G0/G1期的比例增加,停滞在S期的比例减少,G2/M期的比例减少。运动实验结果显示,红景天苷作用72h后,红景天苷组每个视野跨膜细胞数为(39.60±3.37)个,远低于对照组(142.20±12.99)个(P<0.01);侵袭实验提示相似结果,红景天苷组每个视野跨膜细胞数为(4.20±1.55)个,也低于对照组(13.00±3.09)个(P<0.05)。进一步建立了红景天苷作用MDA-MB-435细胞的2DE图谱,采用质谱分析初步鉴定了6个与红景天苷作用相关的表达差异蛋白质,提示红景天苷可能通过调节差异蛋白质表达参与细胞膜组成、离子通道活性调节、细胞信号转导、细胞凋亡、细胞运动等细胞生理过程。结论:①红景天苷能抑制人乳腺癌MDA-MB-435细胞的生长增殖,诱导其发生早期凋亡、晚期凋亡和坏死,同时也能阻滞细胞周期,并降低细胞运动和侵袭能力。②建立了红景天苷作用人乳腺癌MDA-MB-435细胞的双向电泳图谱,通过质谱检测和生物信息学分析,确定了红景天苷作用MDA-MB-435细胞所致的6个差异表达蛋白质,为进一步揭示乳腺癌发生、发展的分子机制提供了实验切入点。