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核酸疫苗是从基因治疗研究领域衍生、发展起来的一种全新疫苗，其组成是含抗原蛋白基因的重组双链环状DNA分子，因其具有免疫力强、性质稳定、制备简单等特点，已经成为疫苗研究的热点。 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是属于黄病毒科的单股正链RNA病毒，主要通过血液途径感染，是人类急、慢性肝炎、肝硬化的主要致病因子之一，亟需发展有效的疫苗以控制其传播。本研究构建一种结构新颖的HCV融合抗原DNA疫苗并观察其在BALB／c小鼠的免疫效果，探讨其用于防治丙型肝炎的可行性。该疫苗编码HCV核心-E2包膜融合抗原。HCV包膜E2抗原是中和抗体的靶抗原，存在保守的中和抗体表位，HCV核心抗原的氨基酸序列在HCV诸抗原中最为保守且有多个T细胞抗原表位，是诱导抗HCV细胞免疫应答的重要候选抗原。 提高抗原表位的免疫原性是发展HCV疫苗的一个有希望的方向。通用型辅助性T细胞表位PADRE能有力激活CD4+ T细胞，使之分泌IL-2、IL-12等细胞因子，这些细胞因子再以旁分泌方式作用于HCV抗原特异性T细胞，从而大大增强疫苗的免疫效率。外源信号肽对于Th免疫应答和CTL免疫应答均有促进作用。 本研究在HCV核心-E2包膜融合抗原基因的5’末端引入编码小鼠IgG kappa链信号肽和一个通用型辅助性T淋巴细胞表位PADRE基因。用重叠延伸PCR拼接信号肽和通用型辅助性T细胞表位的DNA片段，PCR分别扩增HCV核心抗原基因和包膜E2抗原基因，将三段基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)，构成重组表达质粒pST-CE2t，转染COS7细胞，免疫组化检测HCV抗原的表达。将pST-CE2t和仅编码HCV核心-包膜E2融合抗原的质粒pCE2t分别肌肉注射接种BALB／c小鼠，检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖反应。 此DNA疫苗免疫BALB／c小鼠能有效诱导细胞和体液免疫应答，且诱导的抗HCV核心抗原免疫应答强于编码HCV核心-E2融合抗原的DNA疫苗，表明该融合抗原DNA疫苗对于丙型肝炎的预防和治疗有潜在的应用价值。