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目的:近年来,由于兽药抗生素使用不规范,从而导致动物机体内抗生素残留和细菌耐药性的产生,残留的抗生素和耐药菌株又可经食物链转移给人群,从而危害到人群的健康。牛奶是人们经常食用的重要动物性食品,因此经常食用有抗生素牛奶可能影响人们的健康。因此本课题通过:①检测贵阳市售牛奶中氨苄青霉素、磺胺以及链霉素的水平,了解这些抗生素的残留现状;②研究牛奶中不同浓度的氨苄青霉素残留对婴儿肠道内主要有益菌群:双歧杆菌、乳酸杆菌的影响,为抗生素残留对婴幼儿肠道菌群的影响提供一定科学依据。 方法:①于2010年12月--2011年1月间,在贵阳城区4个不同的片区中比较有代表性的各大、中型超市及相关零售乳点,对市售成型包装纯牛奶进行抽样;检测方法利用间接竞争 ELISA技术,将样品牛奶中的残留抗生素与偶联抗原竞争抗生素抗体,再加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光值与检测的抗生素含量成负相关。与标准曲线比较后再乘以对应的稀释倍数,进而得到相应残留抗生素的含量。②利用离体模拟肠道系统,将对应浓度的抗生素进行模拟消化后,与婴儿的粪便稀释液进行37℃厌氧培养,通过计数BL、MRS和BHI培养基上细菌数量的变化情况,分析氨苄青霉素对婴儿粪便中肠道益生菌(乳酸杆菌与双歧杆菌)的影响。 结果:①采购在贵阳市市场上销售的纯牛奶样品共计100份,其中24份检测磺胺,结果中位数为5.352 ng/mL,范围0.312~21.933ng/mL;39份检测了链霉素,中位数2.539 ng/mL,范围0.338~6.949 ng/mL;37份检测了氨苄青霉素,中位数8.887 ng/mL,范围0.362~414.611 ng/mL,磺胺、链霉素的最高检出值均未超过最大允许残留限量。而氨苄青霉素的超标例数为12例,超标率达32.43%。最高检出值达414.611 ng/mL,是最高允许残留限量的41倍;②氨苄青霉素在牛奶中的残留浓度为2 ng/mL时,对婴儿粪便中乳酸杆菌生长有抑制作用,在4ng/mL时对婴儿粪便中双歧杆菌生长有抑制作用,而在6 ng/mL时对肠道细菌总数生长产生了抑制作用。 结论:①贵阳市所售包装奶品还存在一定程度的抗生素残留,在此次的检测中,发现氨苄青霉素在牛奶中超标率情况为32.43%,而同时检测的磺胺与链霉素尚未发现有超标。因此需要加强对奶源户的监测、管理力度,建议有关卫生管理部门将抗生素检测纳入常规检测项目。②在本离体肠道模拟系统中,牛奶中氨苄青霉素残留限值的国家标准10 ng/mL相对婴儿双歧杆菌及乳酸杆菌生长可能是不安全的,对肠道细菌在6 ng/mL时已有抑制作用。