脐血单核细胞体外诱导分化树突状细胞及其对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应研究

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目的 探讨人脐血单核细胞体外诱导分化树突状细胞(DC)的可能性,检测DC对人神经母细胞瘤细胞的杀伤效应。 方法 利用淋巴细胞分离液密度梯度离心法获取脐血单个核细胞,经贴壁法,获得脐血单核细胞,经粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)体外诱导分化为脐血DC。间接免疫荧光法检测DC。MTT法检测DC活化的T细胞对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应。试验组加DC,DC与神经母细胞瘤的比例分别为20∶1,50∶1,100∶1,对照组不加DC。 结果 脐血单核细胞经GM-CSF、IL-4诱导后,第15天倒置显微镜下可见典型形态的DC。荧光显微镜下,CD1a细胞的比例为(43.12±5.83)%。试验组分别与对照组比较,试验组DC刺激的T细胞对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应均高于对照组,差别均具有显著性意义(P<0.01)。100∶1组与50∶1组比较,对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应差别无统计学意义(P>0.05);100∶1组对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应低于20∶1组,差别有统计学意义(P∶0.05);50∶1组对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应低于20∶1组,差别有统计学意义(P<0.05)。 结论 人脐血单核细胞体外经细胞因子诱导分化培养,可生成大量的DC。DC体外可促进T细胞对神经母细胞瘤细胞的杀伤效应。
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