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本文通过建立的实验动物(大鼠)模型,探讨了同时采用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌人工诱发乳腺炎时,大鼠乳腺局部及整个机体免疫功能的变化;并通过给大鼠注射免疫增强剂CpG-ODN,探索其在大鼠发生实验性乳腺炎时,对乳腺局部免疫和机体免疫功能的影响。 1.两种病原菌联合诱导大鼠实验性乳腺炎的研究 18只饲喂基础日粮的泌乳初期SD雌性大鼠随机分成三组(n=6),产后72h分别用灭菌0.01mol·L-1,pH7.2PBS(CON组)、低浓度组(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在混悬液中的浓度都为1×105CFU·mL-1,L组)和高浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在混悬液中的浓度都为1×1012CFU·mL-1,H组),经乳头管灌注到大鼠第四对乳腺内,灌注后24h颈静脉放血处死。取部分乳腺组织进行组织学观察。低浓度(L组)乳腺的病变主要以腺泡上皮发生轻度的脂肪变性,腺泡腔的分泌物中有透明滴状物为主要特征,高浓度(H组)的乳腺腺泡结构破坏严重,腺泡中有较多的嗜中性粒细胞浸润。实验组乳腺和血清IL-1β水平较对照组均有所升高,其中H组乳腺和血清IL-1β水平分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于对照组。L组乳腺和血清IL-6水平较对照组均有所升高,但差异不显著,H组乳腺IL-6则有显著(P<0.05)下降,H组血清IL-6水平则极显著(P<0.01)低于对照组;实验组组乳腺TNF-α水平均高于对照组,其中L组升高差异不显著,H组乳腺则极显著高于对照组(P<0.01),血清TNF-α水平均下降,其中L组下降差异不显著,H组则极显著(P<0.01)低于对照组。实验组乳腺NAGase活性均高于对照组,其中H组极显著(P<0.01)高于对照组;实验组血清NAGase活性均低于对照组,其中H组极显著(P<0.01)下降。H组乳腺和血清MPO活力均显著(P<0.05)高于对照组。实验组乳腺白蛋白含量均高于对照组,其中H组乳腺白蛋白显著高于对照组(P<0.05),L组血清白蛋白含量高于对照组,H组血清白蛋白显著低于对照组(P<0.05)。由上述结果可知高低浓度的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合诱导的大鼠乳腺炎模型均已成功建立。 2.CpG-ODN对两种细菌联合诱导的大鼠实验性乳腺炎的作用研究