柯乐猪、大白猪血液基因组甲基化修饰与细胞因子浓度相关性研究

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为探明柯乐猪血液免疫细胞的基因表达是否受甲基化调控,应用甲基化敏感扩增多态性技术(MSAP)和酶联免疫吸附测试技术(ELISA)对柯乐猪与大白猪血液基因组DNA的甲基化水平、血清中的细胞因子浓度进行检测,分析了柯乐猪与大白猪在甲基化水平、细胞因子浓度方面的差异及其相关关系。  结果表明,柯乐猪半甲基化水平为16.65%,全甲基化水平为15.73%,总甲基化水平为32.38%;大白猪半甲基化水平为16.84%,全甲基化水平为18.13%,总甲基化水平为34.97%。柯乐猪基因组总甲基化水平为32.38%,与大白猪接近(P>0.05)。  酶联免疫吸附测定结果显示,柯乐猪、大白猪IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-α、IFN-γ细胞因子浓度为(302.37±125.72)pg/mL、(260.29±147.67)pg/mL;(88.71±32.05) pg/mL、(69.74±49.53) pg/mL;(219.01±30.42)pg/mL、(844.91±58.69)pg/mL;(116.95±30.24)pg/mL、(190.03±141.75)pg/mL;(211.09±76.08)pg/mL、(118.80±85.18)pg/mL;(57.18±14.21)pg/mL、(41.77±29.57)pg/mL。IL-6、IL-10分别极显著、显著低于大白猪;IFN-α、IFN-γ分别极显著、显著高于大白猪。  利用SPSS v20.0软件中Spearman、ANOVA方法对柯乐猪、大白猪的甲基化水平与细胞因子浓度进行相关性分析,柯乐猪血液基因组全甲基化水平与IFN-γ浓度呈弱负相关(ρ=-0.256)。对柯乐猪的2个甲基化差异位点的DNA片段进行克隆、测序和分析,定位在猪的14号,6号染色体,分别是转录因子AP-2和NF-E2的启动子区域。
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