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目的：1.建立一种在线衍生高效液相色谱紫外-荧光法同时测定血浆中色氨酸（tryptophan，Trp），犬尿氨酸（kynurenine，Kyn），5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindole acetic acid，5-Hiaa)和犬尿喹啉酸（kynurenic acid，Kyna)的浓度。2.用所建立的方法测定正常孕妇，糖尿病患者，肝硬化患者和健康对照组血浆中Trp，Kyn，5-Hiaa和Kyna的含量，从而更全面地了解人体内不同生理和病理状态下Trp代谢情况。方法：1.采用Hypersil C18柱（250mm×4.0mm；5μm）分离，以3-硝基酪氨酸（3-N-Tyr）为内标（IS）。流动相为250mmol／L醋酸锌溶液（pH5.5）-乙腈（95:5，v／v）；流速0.8ml/min；柱温30℃；进样量：50μL；紫外检测波长程序：0.00~13.00min，360nm；13.01~17.00min，302nm。荧光检测波长程序：0.00~10.00min，激发光波长（Ex）和发射光波长（Em）分别为278nm和343nm；10.01~14.00min，Ex和Em分别为244nm和400nm；14.01~17.00min，Ex和Em分别为302nm和400nm；分析时间18min。2.利用该方法测定糖尿病患者（n=101），正常孕妇（n=70），肝硬化患者（n=68）和健康对照组血浆（n=54）中Trp，Kyn，5-Hiaa和Kyna的含量。结果：1.5-Hiaa，Kyn，3-N-Tyr，Kyna和Trp保留时间分别为6.7，9.0，11.4，13.5，16.1min。5-Hiaa，Kyn，Kyna和Trp线性范围分别为：3.27~104.60nmol／L，0.32~15.36μmol／L，14.0~464.8nmol／L和2.5~320.0μmol／L，最低检测限分别为：1.22nmol／L，0.048μmol／L，1.29nmol／L和0.54μmol／L。4种物质的平均回收率为91﹪~113﹪，日内和日间变异系数均小于5﹪。2.糖尿病患者血浆中5-Hiaa，Kyn，Kyna，5-Hiaa/Trp和Kyn/Trp均高于正常对照组（p<0.01），两组间的差异具有统计学意义。3.正常孕妇与正常对照组相比，Kyn，Kyna和Kyna/Kyn比值均降低（p<0.05），而5-Hiaa和Trp含量无显著性差异。4.肝硬化患者与正常对照组相比，Trp显著降低（p<0.01），而5-Hiaa，Kyn/Trp，Kyn，Kyna，和5-Hiaa/Trp均增加（p<0.05）。肝硬化患者白蛋白与Kyn浓度正相关，谷草转氨酶（AST）与5-Hiaa浓度正相关，白球比值与Trp浓度正相关。结论：1.本文建立了一种在线衍生高效液相色谱-紫外/荧光法同时检测血浆中Trp，Kyn，5-Hiaa和Kyna含量，该方法具有快速，灵敏，简便的特点，适用于临床常规检测和科学研究。2.用所建立的方法分析了正常孕妇，糖尿病患者及肝硬化患者体内Trp代谢，发现这3组人群中均存在Trp代谢紊乱。正常孕妇体内Trp代谢增加，糖尿病患者Trp代谢增强，肝硬化患者Trp代谢显著增强。且肝硬化患者白蛋白和AST浓度及白球比值与Trp代谢具有相关性。