磁小体是趋磁细菌体内合成的,由生物膜包被的纳米级磁性颗粒,含有多种膜蛋白,其中Mam C含量最丰富,MamF与磁小体膜结合最紧密。磁小体具有形态大小一致、单磁畴、顺磁性、低毒性以及生物相容性好等优点,应用前景很高。表面修饰是磁小体应用的关键,本实验采用“表面展示”策略,将生物素羧基载体蛋白基因(bccp)和链霉亲和素基因(sa),分别与磁小体膜蛋白基因mamC和mamF的N端进行融合,构建了四株重组菌株,即MSR-△F-BF、MSR-△C-BC和MSR-△F-SF、MSR-△C-SC。获得两类重组磁小体,即BMP-△F-BF、BMP-△C-BC和BMP-△F-SF、BMP-△C-SC。根据生物素与亲和素间,高效特异性的结合作用,分别将构建的重组磁小体用于检测亲和素固定化和生物素化的物质。首先,通过Westen blotting检测到融合蛋白成功展示到重组磁小体表面。对重组菌株的生长状况,及磁响应状况进行了分析,发现融合蛋白的表达,可部分回补受体菌。通过透射电镜观察重组磁小体的形态结构,发现融合蛋白的表达并未影响磁小体的合成及形态。采用ZetaPLAS仪器分析了重组磁小体的水合粒径及zeta电位,发现重组磁小体表面由于结合大量的融合蛋白导致其平均水合粒径比野生型大(30-90nm),zeta电位数值均低于-30mV,表明磁小体的分散性及所形成溶液的稳定性较好。其次,优化了重组磁小体BMP-△C-SC的纯化及储存条件,发现随着纯化次数的增加,重组磁小体表面融合蛋白数量不断减少,重组磁小体的纯化标准需进一步确立。最后,将重组磁小体进行不同条件储存,发现液氮有利于重组磁小体的储存。重组磁小体BMP-△F-BF、BMP-△C-SC进行了初步应用检测,推测表面展示有生物素的磁小体可与亲和素固定化的物质相互作用,可用于亲和素固定化物质的检测。用于偶联表面展示有链霉亲和素重组磁小体的生物素化物质还有待于进一步确定。本研究获得初步结果,为建立磁小体表面展示平台奠定了基础。