DCA和TGR-5参与胆管癌细胞增殖及转移的研究

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背景:胆管癌是一种呈低分化、高侵袭性的恶性肿瘤。胆管癌发病率低,但近年来全球范围内胆管癌的发病率有明显的上升趋势。胆汁酸是组成胆汁的重要部分,近年来受到许多关注。脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)是游离胆汁酸的一种,与胆管癌的发生发展有关。胆汁酸作为配体,能够活化多种受体,包括G蛋白偶联胆汁酸受体5(TGR-5)。研究表明,TGR-5可被多种胆汁酸激活,TGR-5也可以通过激活各种信号路在多种肿瘤的发生发展中发挥作用,而目前在胆管癌中的作用及其机制尚不明确。目的:探讨胆汁酸(DCA)与胆汁酸膜受体TGR-5对胆管癌细胞增殖及转移发生过程中的作用。方法:通过PCR及Western blots检测TGR-5在胆管癌细胞RBE及正常胆管细胞HIBEPic中的表达水平;采用MTT检测不同浓度DCA对RBE细胞增殖的影响;采用Transwell检测DCA对RBE细胞侵袭力的影响;采用Western blots检测DCA对RBE细胞中EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Snail)的表达水平。结果:TGR-5 mRNA及蛋白在胆管癌细胞RBE中高表达,在正常胆管细胞HIBEPic中低水平表达;DCA能够提高胆管癌细胞的活力,且与DCA浓度呈正相关;Transwell结果显示与对照组相比,DCA组的RBE细胞侵袭数目明显增多;Western blots实验结果提示DCA组RBE细胞的E-cadherin表达下调,而N-cadherin、Vimentin和Snail表达上调,诱导RBE细胞发生EMT。结论:TGR-5在胆管癌RBE细胞中高表达,与胆管癌的进展密切相关。DCA能够增强RBE细胞活力,促进其增殖。DCA能通过上调Snail、N-cadherin、Vimentin表达,下调E-cadherin表达,诱导RBE细胞发生EMT,促进胆管癌细胞转移。
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