目的:癫痫是中枢神经系统疾病中常见疾病,是由神经元异常放电所致,按照异常放电神经元的部位及扩散的范围可导致不同的功能失常表现,可表现为运动、感觉、意识、行为、自主神经等不同障碍。按发作病因可分为:特发性癫痫,隐源性癫痫及症状性癫痫。但癫痫病因复杂,临床中不能查出病因的癫痫约占癫痫患者的60%-70%。近来,大量研究表明肠道细菌可能通过免疫、代谢、内分泌等多种途径影响中枢神经系统疾病的发生,那么肠道微生物群与癫痫发病有无相关性?本文旨在通过16S rRNA序列设计法对三组(健康对照组、癫痫控制组、难治性癫痫组)的肠道菌群进行分析,通过比较三组的菌群构成来分析肠道菌群失调与癫痫发病有无相关联系,比较癫痫控制组与难治性癫痫组肠道菌群分析肠道菌群与癫痫控制的难易程度有无相关性,并进一步设计动物实验,通过构建癫痫小鼠模型的方法进一步探讨粪菌移植治疗癫痫的可能性及探讨相关机制。方法1(临床实验):2017年11月至2018年4月,随机选取在嘉兴市第二医院就诊的癫痫患者35人为实验组,其中癫痫控制组22例,难治性癫痫组13例,同时期9例健康人为对照组,年龄在18-60岁之间。收集粪便提取肠道微生态菌群DNA,应用Illuminate Hiseq PE25016SrDNA测序分析技术,对三组粪便标本的肠道微生态菌群进行生物分类学上的比较、微生物多样性分析、细菌丰度分析及组间物种差异分析。方法2(动物实验):选取清洁小鼠40只,将小鼠随机分为四组,分别为正常组(NC)、戊四氮组(PTZ)、戊四氮+移植组(PTZ+EXP)各10只,余下10只小鼠常规培养,用于提取粪菌。PTZ组和PTZ+EXZ组小鼠给予PTZ40mg/kg腹腔注射给药,连续14天,构建慢性癫痫小鼠模型,NC组小鼠予生理盐水腹腔注射,比较正常组、PTZ组、PTZ+EXZ组小鼠癫痫发作等级、行为学、认知功能、脑组织代谢产物。结果:1、对照组、癫痫控制组、难治性癫痫组三组之间肠道微生物群差异比较三组相比,整体肠道菌群存在明显差异(P=0.008)。在门水平,健康对照组放线菌门明显低于癫痫控制组和难治性癫痫组。在科水平,健康对照组普雷沃氏菌科明显高于癫痫控制组和难治性癫痫组,而放线菌门歧杆菌科、前原形科、产碱菌科、瑞香科、灯盏花科、鞘氨醇单胞菌科则明显低于癫痫控制组和难治性癫痫组。在属水平,健康对照组普雷沃氏菌属明显高于癫痫控制组和难治性癫痫组,放线菌门的Bifidobacterium、fRuminococcaceae、Alcaligenes、Alistipes、Gemmiger则明显低于癫痫控制组和难治性癫痫组。2、癫痫控制组与难治性癫痫组肠道菌群比较两组相比,整体肠道菌群在丰度及多样性上无明显差异(P=0.076),在普雷沃氏菌科及放线菌科,癫痫控制组与难治性癫痫组无统计学差异。3、动物实验结果对比三组小鼠癫痫发作等级,正常组小鼠无癫痫发作,戊四氮+粪菌移植组小鼠癫痫发作程度及次数显著降低,相比戊四氮组具有显著差异(P<0.05),同时戊四氮+粪菌移植组小鼠认知力、记忆能力显著改善。戊四氮+粪菌移植组小鼠脑组织中GABA、Gly及Glu的水平显著改变,相比戊四氮组具有显著差异(P<0.05)。戊四氮+粪菌移植组小鼠脑组织中MDA水平下调,GSH水平上调,相比戊四氮组具有显著差异(P<0.05)。结论1、健康对照组与癫痫患者肠道菌群构成有明显差异。2、癫痫控制组与难治性癫痫组肠道菌群构成无明显差异。3、粪菌移植改善肠道菌组成后,对于慢性癫痫小鼠有着抑制癫痫发作的作用,作用机制和促进抗氧化蛋白的表达、减轻癫痫后神经细胞结构损伤有关。