EES、VPA对LPS海马C-fos蛋白表达影响及意义的研究目的:通过建立氯化锂-匹罗卡品癫痫(Lithium-Pilocarpine Seizures, LPS)慢性大鼠点燃模型,观察造模后Spague-Dawley(SD)大鼠点燃的成功率、存活率,及其影响因素;应用免疫组织化学方法观察C-fos蛋白免疫反应阳性表达细胞在LPS各研究时间点大鼠海马CA1、CA2、CA3、齿状回(Dentate Gyrus, DG)及齿状回前区(poDG)的表达,以及经全蝎醇提物(ethanol extractive of scorpion, EES)不同剂量级、丙戊酸(valproic acid, VPA)干预后对C-fos免疫反应阳性细胞表达的影响及意义;探索C-fos蛋白在癫痫发病机制中的作用和EES可能的抗癫痫作用机制。方法:(1)清洁级健康成年雄性SD大鼠295只,除正常对照组6只外,其余289只均造模。(2)对造模成功的模型鼠随机分组,分别为模型对照组、VPA干预组、EES不同剂量级干预组(EES低剂量干预组、EES中剂量干预组、EES高剂量干预组);(3)在不同时间点运用免疫组织化学技术观察上述各组大鼠脑内海马各区C-fos蛋白免疫反应阳性细胞的表达。结果:(1)经反复多次小剂量注射匹罗卡品(Pilocarpine,Pilo)后总点燃率为93.77%(271/289),达到SE发作为85.47%(247/289),造模时死亡率为4.85%(14/289);(2)在药物干预实验过程中实际使用LPS慢性模型鼠239只,30d慢性观察期内经不同的干预处理后有23只模型鼠死亡,死亡率为9.62%(23/239),造模经各种药物干预后存活率为90.3%(216/239);(3)模型对照组大鼠海马区C-fos免疫反应阳性细胞分别在2d、7d表达显著增加,30d恢复并接近正常对照组表达水平;(4) EES中、高剂量(EESM、EESH干预组)和VPA干预后对C-fos免疫反应阳性细胞表达均有明显下调,与模型组比较有统计学意义(P<0.01) ,但前三者之间比较差异无统计学意义(P>0.05);EES低剂量组(EESL干预组)表达有明显下调趋势,但与模型组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)本实验采用反复多次小剂量给予Pilo和在模型鼠出现癫痫持续状态(status epileticus, SE)后及时给予地西泮终止发作,可提高点燃成功率,同时降低模型鼠死亡率,为在LPS上进行相关研究提供了经济可靠的研究载体;(2) LPS模型在急、慢性期均存在显著的海马神经元结构损伤,可见到海马各区C-fos的表达呈双相性改变,这种变化可能与模型鼠癫痫的自限性反复发作机制和C-fos蛋白的正反馈抑制有关;(3) EES中高剂量可显著下调LPS模型鼠海马神经元C-fos免疫阳性细胞表达,推测可能是其重要的抗癫痫作用机制之一。(4) VPA干预后也可显著下调C-fos免疫阳性细胞表达,这可能是其主要的抗癫痫作用机制之一;(5) EES、VPA均能在LPS中显著下调C-fos蛋白的表达,这可能是二者具有的相同的抗癫痫作用机制之一。