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目的：选择针对livin反义脱氧核寡酸(antisense oligodeoxynucleotide, ASODN),利用脂质体LipofectamineTM 2000转染作用于肝癌HepG2细胞,观察其对增殖抑制、促凋亡、对常用化疗药物的敏感性的影响,为肝癌的基因靶向治疗提供一种新的探索。方法：1研究靶向livin ASODN对肝癌HepG2细胞的作用机理：(1)WST-8法检测livin ASODN对HepG2细胞增殖的影响。(2)RT-PCR检测livin ASODN作用后HepG2细胞livin-mRNA表达量的改变。(3) Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变。(4)PI单染流式细胞仪检测livin ASODN对HepG2细胞周期及亚二倍体百分率的影响。(5) ANNEXIN V/PI双染检测livin ASODN对HepG2细胞早期凋亡率的影响。2 WST-8法检测肝癌HepG2细胞的药物敏感性变化：选择临床常用化疗药物卡铂(Carboplatin,CBP)和表柔比星(Epirubicin,EPI)分别联合靶向livin ASODN作用于肝癌HepG2细胞,采用WST-8法检测细胞增殖抑制作用,计算各组药物的增殖抑制率和半数抑制浓度(IC50),并通过金正均的概率和法,计算联合用药的效果(作用拮抗、作用相加、作用协同)。结果：1靶向livin ASODN对HepG2细胞的作用机理：(1)靶向livin ASODN在不同的浓度,不同的时间点对HepG2细胞增殖均有较高的抑制作用,且呈现剂量-时间-效应关系,ASODN对HepG2细胞的IC50为204.52 nmol／L。(2) Livin ASODN能够显著抑制HepG2细胞livin-mRNA表达量,其抑制效果随livinASODN浓度的增加而增加,400 nmol／L浓度组抑制率达52.5%。(3) Hoechst 33258染色观察：空白对照组、随机序列RODN (random oligonucleotide)对照组细胞都未见明显的凋亡现象；而livin ASODN组可见细胞凋亡的形态学改变：核固缩、核碎裂,出现大小不一碎片,凋亡小体,呈颗粒状绿色荧光。(4)PI染色观察检测细胞亚二倍体百分率：空白对照组、随机序列RODN对照组均未出现细胞亚二倍体峰；livin ASODN组明显存在HepG2早期凋亡细胞,100 nmol／L、200nmol／L、400 nmol／L浓度livin ASODN组细胞亚二倍体百分率分别为13.2%,13.9%,18.9%。(5) ANNEXIN V/PI双染检测细胞凋亡情况：空白对照组、随机序列RODN对照组细胞未见明显凋亡情况；高浓度livin ASODN组可见明显凋亡,400 nmol／L浓度组细胞凋亡率达18.9%。2靶向livin ASODN提高肝癌HepG2细胞对化疗药物的敏感性：单用CBP的IC50为22.31 mg/L；CBP与livin ASODN(100 nmol/L)联合使用,表现为协同作用(Q≥1.15),IC50为6.18 mg/L,增敏倍数为3.61；单用EPI的IC50为2.40 mg/L；EPI与livin ASODN(100 nmol/L)联合使用,表现为协同作用(Q≥1.15),IC50为0.19 mg/L,增敏倍数为12.63；Livin ASODN提高了肝癌HepG2细胞对卡铂(CBP)和表柔比星(EPI)的敏感性。结论：1靶向livin ASODN能高效抑制肝癌HepG2细胞的增殖。2 Livin ASODN能够有效抑制livin-mRNA的生物合成。3 Livin ASODN能够促进细胞凋亡,引起核固缩、核碎裂。4 Livin ASODN联合化疗药物CBP、EPI作用于HepG2细胞,livin ASODN提高了肝癌细胞对卡铂(CBP)和表柔比星(EPI)这些化疗药物的敏感性。