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食物过敏(Food allergy)是一种常见的过敏性疾病,严重影响着过敏人群的身体健康,引起了各国政府和公众的普遍关注。为了控制过敏发病率的增长,开发新型天然活性组分用以防治食物过敏,引起越来越多学者的关注。龙须菜多糖具有抗肿瘤、抗病毒、缓解低血糖等生物活性。目前关于龙须菜硫酸多糖的抗过敏作用研究尚未见报道,所以研究龙须菜硫酸多糖的抗食物过敏活性,并进一步探究其抗过敏机理,对于开发抗过敏功能食品及新型抗过敏药物具有重要的意义。本研究首先通过热水浸提、低压浓缩、乙醇沉淀等方法从龙须菜中提取得到硫酸多糖粗样,再利用DEAE-cellulose 52纤维素柱层析制得高纯度的龙须菜硫酸多糖(sulfated polysaccharide from Gracilaria lemaneiformis,GLSP),纯化出的GLSP的分子量为152,481Da,其主要单糖组分是半乳糖,含量为87.49%,经红外光谱分析,GLSP内部含有3,6-内醚半乳糖和硫酸基团,3,6-内醚半乳糖含量为8.23%,硫酸根的含量为11.26%。通过体外细胞模型研究发现,龙须菜硫酸多糖能够抑制大鼠嗜碱性粒细胞RBL-2H3细胞脱颗粒,且其抑制率与GLSP的硫酸根含量成正比;GLSP能够降低RBL-2H3细胞组胺、活性氧的分泌,抑制其释放过敏相关细胞因子IL-4、TNF-α;能够下调IgE介导的KU812细胞表面抗原CD63、CD203c的表达,并可以降低KU812细胞p38 MAPK磷酸化水平,起到抑制过敏反应中嗜碱性粒细胞激活的活性。龙须菜硫酸多糖能够缓解TM致敏小鼠的过敏反应症状,抑制小鼠血清组胺及小鼠肥大细胞蛋白酶(mMCP)-1的产生;能够抑制Th2细胞因子(IL-4、IL-13)的分泌及Th2转录因子GATA-3的基因表达,促进调节性T细胞(Treg)细胞因子(IL-10、TGF-β)的分泌及Treg细胞转录因子Foxp3的基因表达,通过增强Treg细胞功能起到免疫抑制作用,从而起到抑制Th2细胞主导的食物过敏反应的活性;龙须菜硫酸多糖对于食物过敏的预防作用优于治疗作用。综上所述,龙须菜硫酸多糖能够抑制IgE介导的RBL-2H3和KU812的激活与功能,减缓小鼠过敏反应症状,降低小鼠血清中TM特异性IgE和IgG1的水平,促进调节T细胞细胞因子分泌及其转录因子的表达,抑制Th2细胞因子的产生及其转录因子表达,并且可以抑制嗜碱性粒细胞p38 Mitogen-activated protein kinase(MAPK)信号通路的传导。综合体外细胞模型及小鼠模型的实验结果,可以得知龙须菜硫酸多糖能够通过免疫抑制作用及抑制效应细胞p38 MAPK信号通路起到抗食物过敏的活性。