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近年来，胶乳免疫层析技术由于操作简便、稳定性好、灵敏度高等优点，被广泛应用于快速免疫检测中。但是，胶乳免疫层析技术也存在其自身的缺陷，在检测应用过程中会有假阴和假阳现象的发生，这些问题的出现必定会对胶乳免疫层析的应用产生不利影响。所以，研究控制影响免疫层析技术应用的各因素，探索假阴和假阳现象发生的本质原因，对于促进胶乳免疫层析技术更为广泛的应用显得至关重要。本研究利用共价偶联的方法制备了免疫胶乳，并利用电镜、动态光散射以及Zeta-电位对免疫胶乳的稳定性进行了深入的研究，结果表明：在活化剂为EDC/NHS、活化时间15min、反应缓冲体系为磷酸盐缓冲液、偶联时间2.5h、偶联体系pH值6和抗体蛋白浓度800μg/mL的条件下，偶联率最高；电镜、动态光散射以及Zeta-电位的研究结果表明，胶乳微球与抗体蛋白共价偶联后，稳定性有所提高；利用傅里叶红外光谱技术结合计算机辅助分析技术探索了不同偶联条件下制备的免疫胶乳上抗体蛋白二级结构的变化情况，结果表明：随着pH值、胶乳浓度以及抗体蛋白浓度的升高，抗体蛋白分子有序结构含量升高，这与抗体蛋白分子与胶乳颗粒间的斥力以及空间位阻增大有关；利用荧光光谱法对免疫胶乳的性质进行了研究，揭示了胶乳微球与抗体蛋白之间的相互作用机理，结果表明：共价偶联后，胶乳微球对抗体蛋白的内源荧光有显著的猝灭作用，猝灭机制为静态猝灭；静电相互作用为胶乳-抗体蛋白复合物中的主要相互作用力，且这些相互作用力使抗体蛋白的三级结构发生了一定的变化，从而导致抗体蛋白表面疏水性也发生相应的变化；利用免疫胶乳制备了胶乳免疫层析试纸条，并对不同偶联体系中制备的免疫胶乳上HCG-α抗体蛋白的分子结构与灵敏度和特异性的关系进行了相关的探索研究，结果表明：在pH为6，胶乳浓度为1%以及抗体蛋白浓度为0.8mg/mL时，免疫胶乳上抗体蛋白的灵敏度最高；在pH<6，抗体蛋白浓度<0.6mg/mL以及胶乳浓度<0.75%时，有假阳现象的发生；免疫胶乳上抗体蛋白的分子结构与灵敏度和特异性间有显著的联系，有序结构含量的增加会使抗体蛋白的灵敏度值和特异性都升高。