毛冬青组分配比对大、小鼠短暂性脑缺血发作模型的干预作用研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengfang66
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  目的:通过基线等比增减设计研究毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷不同配比组分对小鼠TIA模型和大鼠TIA模型的影响,完善中药有效组分配比优化筛选模式,筛选出毛冬青防治TIA的最优活性配比组分,为皂酮胶囊的后续研究奠定基础。   方法:筛选实验:通过基线等比增减设计毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷0:10、10:0、10:2、10:3、10:4、10:5、10:6、10:8、10:10 不同配比组分对小、大鼠TIA动物模型的影响,采用综合权重法评价毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷各配比组分对小、大鼠TIA模型动物的影响结果,筛选出毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷较优配比组分;验证实验:通过小、大鼠TIA动物模型实验验证筛选实验结果,采用综合权重法评价验证实验结果,最终确定毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷防治TIA的最优活性配比组分。   采用尾静脉注射过氧化叔丁醇建立小鼠TIA模型:小鼠尾静脉注射0.11mol/L过氧化叔丁醇(7.5ml/kg)10min后,置于0.45L的广口瓶中,密封,使小鼠缺氧15min后取出,进行行为学评分,筛选实验测定脑组织MDA、NO、NOS及SOD活力、脑组织形态变化;验证实验测定脑组织MDA、LD含量,SOD、LDH活力,以及脑组织形态变化。采用尾静脉注射过氧化叔丁醇建立大鼠TIA模型:大鼠第1 次诱发时,尾静脉注射 0.11mol/L 过氧化叔丁醇 5.2ml/kg,10min 后,置于 1L的广口瓶中,密封,使大鼠缺氧10min后取出,进行行为学评分。大鼠第2次诱发时,尾静脉注射0.154mol/L过氧化叔丁醇5.2ml/kg,10min后,置于1L的广口瓶中,密封,使大鼠缺氧10min后取出,进行行为学评分,筛选实验测定血浆LPA含量,测定脑组织 LD、LDH、ATP 酶含量及脑组织形态变化;验证实验测定血浆LPA含量、脑组织ATP酶活性、兴奋性氨基酸含量,以及脑组织形态变化。   结果:筛选实验结果:小鼠、大鼠TIA动物模型均造模成功。毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷不同配比组分均可显著降低小、大鼠行为学评分,显著改善小、大鼠脑组织病理损伤,显著降低小鼠MDA水平,显著升高脑内SOD水平,显著降低NO含量及NOS活力,减少自由基对脑的损伤作用;显著减少大鼠脑部LD含量,增高LDH活力,显著提高脑内Na+-K+-ATP酶、Ca++-ATP酶、Mg++-ATP酶的活力,改善脑细胞能量代谢。用综合权重法评价,以10:6为最优配比组分。验证实验结果:毛冬青活性部位总黄酮与总皂苷10:5、10:6、10:7配比组分大、中剂量组均可显著降低小鼠行为学评分,显著改善小、大鼠脑组织病理损伤,显著降低小鼠脑组织MDA、LD含量,显著升高小鼠脑内SOD、LDH活力,显著升高大鼠脑内Na+-K+-ATP酶、Ca++-ATP酶、Mg++-ATP酶活力,改善脑细胞能量代谢,显著降低大鼠脑组织兴奋性氨基酸含量,10:5、10:6大、中剂量组可显著降低大鼠血浆LPA水平,用综合权重法评价,以10:6为毛冬青总黄酮与总皂苷最优活性配比组分。   结论:筛选实验:基线等比增减设计毛冬青总黄酮与总皂苷不同配比组分中以10:6为防治TIA优选配比组分;验证实验:以毛冬青总黄酮与总皂苷10:6为中心,上下各加一个配比组分,通过小、大鼠TIA动物实验验证,结果与筛选实验相符,最终确定10:6为毛冬青总黄酮与总皂苷防治TIA最优活性配比组分。
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