藏红花细胞和组织培养的过程调控

来源 :中国科学院过程工程研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangming2106
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为解决藏红花资源短缺和藏红花病毒感染的问题,本论文较系统地研究了高产藏红花素细胞系的诱导、筛选和培养的过程调控,并利用生物反应器规模化培养细胞直接生产藏红花的主要活性成分藏红花素;同时对筛选到的细胞系进行脱毒,调控胚性愈伤的发生、增殖和分化过程,建立了稳定高效的藏红花芽再生体系,为藏红花的人工种植提供大量、无毒、优质种苗.首先对藏红花球茎、芽、叶子和花愈伤组织以及栀子叶子和种子愈伤组织进行了系统诱导,获得了大量的藏红花和栀子愈伤组织细胞系.首次建立了一简便的筛选高产藏红花细胞的方法即目视法和HPLC相结合的方法.采用该方法从诱导的229株藏红花细胞系和15株栀子细胞系中快速筛选出一株藏红花素含量较高、生长快速、不易褐化的藏红花球茎1细胞系.建立了藏红花细胞的悬浮培养体系.悬浮培养时细胞的生长周期约为20d,在20d时生物量达到最大,为12.3 g DW/L,但是藏红花素的合成周期大约为28d,在28d时藏红花素的含量和产量达到最大,分别为95.8mg/g和0.92 g/L.藏红花素的积累与细胞的生长之间的关系为半生长偶联型.首次采用二步培养法生产藏红花素.在接种量、培养温度、光照条件和培养时间都相同的条件下,同样的藏红花细胞系采用该二步法生产的藏红花素是一步法的3.04倍.首次进行了稀土元素对藏红花细胞生长和藏红花素合成影响的研究.与导流简气升式和筛网导流筒气升式生物反应器相比,采用鼓泡塔式反应器培养,藏红花细胞的生长速度快,藏红花素的产量也比较高,因此更有利于规模化生产藏红花素.藏红花细胞在2.5L鼓泡式生物反应器中悬浮培养28d后,细胞生物量为9.6 g DW/L,增长3.2倍,藏红花素的产量为0.45 g/L.在愈伤组织再分化成苗的过程中对藏红花材料进行了脱毒处理,并首次采用间接ELISA和RT-PCR方法检测了国内外报道的藏红花五种病毒.经过ELISA和RT-PCR检测,在本研究筛选的藏红花愈伤组织和再分化芽中没发现有TuMV、TRV、CMV和Potyvirus病毒.通过优化一些物理和化学因素,提高藏红花胚性愈伤的增殖系数和分化能力,首次建立了高效稳定的再生体系.
其他文献
该论文生长了四种不同[Li]/[Nb]比的In:Fe:LiNbO晶体并研究了[Li]/[Nb]比的改变对In:Fe:LiNbO晶体的本征缺陷、掺杂离子在晶体中的占位以及对晶体光折变性能的影响.采用提拉
酸雨污染是当今世界面临的最严重的污染之一,污染面积十分广泛。我国南方地区的许多地方已为世界三大酸雨污染区之一。酸雨以及酸雨带来的酸性物质的沉积对外来植物入侵的影响
聚丙烯腈纤维是丙烯腈与少量第二,第三单体的三多元共聚物纤维,本文以氯酸钠(SC)-亚硫酸氢钠(SBS)为氧化-还原引发体系,在10升连续搅拌反应器(CSTR)铝釜中进行了丙烯腈(AN)-
学位
  The plant hormone ethylene is regarded as the major regulator of climacteric fruit ripening but the assumptions that fleshy fruit ripening is likely driven
会议
双向拉伸聚酯(BOPET)薄膜具有优异的综合性能,但是现有BOPET薄膜不能满足阻隔性高档包装薄膜材料的要求.该论文采用添加层状硅酸盐的方式,对聚酯进行了改性,对制备高透明、高
在动物细胞大规模培养过程中营养物耗竭和大量代谢副产物的积累往往是限制细胞生长密度、影响培养过程经济性的主要矛盾.葡萄糖和谷氨酰胺是主要的营养物质,本文以调控rCHO细
  Fruit cuticle,which is composed of cutin and wax and biosynthesized during fruit development,plays important roles in the prevention of water loss and the r
会议
裸子植物是现存种子植物中的一大分支,其系统发育关系(尤其是盖子植物纲的系统位置)对于我们了解种子植物的进化具有极其重要的意义。本论文收集并测定了世界范围内涵盖16科7
该文研究了甲醇制烯烃(MTO)反应体系中诸反应的焓变、吉布斯自由能和化学平衡常数.在等温积分管式反应器中研究了工艺条件(温度、空速和水醇比)对C~C烯烃转化率及其选择性的