新疆酿酒葡萄中芪类化合物的分离及抗氧化研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:ya0000000000
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目的:酿酒葡萄中富含多种生物活性成分,如芪类、黄酮类以及萜类等,是天然抗氧化剂的良好来源。这些活性物质不仅能够做为食品抗氧化剂,还有很多有益于人体健康的潜在功效。本试验以新疆酿酒葡萄种植业废弃物之一的葡萄茎为实验材料,从中分离活性物质并测定其抗氧化活性,以期得到活性良好的化合物,寻找植物来源的天然抗氧化剂以取代合成抗氧化剂,为新型食品添加剂的开发、提高葡萄茎的利用率实现变废为宝提供理论依据。方法:本试验中葡萄茎中的活性物质采用了传统的有机溶剂萃取法,结合正相硅胶,Sephadex LH-20凝胶,高效液相等多种色谱法进行分离纯化,用质谱分析、核磁共振分析及测定物质比旋光度来确定化合物的结构。运用三种体外化学抗氧化方法(DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法以及还原力测定实验)及细胞抗氧化活性法(CAA)综合评价了5种芪类化合物的抗氧化活性。最后,用实时荧光定量PCR技术测定了5种芪类化合物对ABAP致损hep G2细胞内6种细胞凋亡相关基因及3种氧化应激相关基因家族表达的影响。结果:共鉴定出5种芪类化合物,分别为:一对白藜芦醇二聚体同分异构体Trans-ε-viniferin和(+)-Cis-ε-Viniferin,一个白藜芦醇四聚体(-)-Hopeaphenol,一对同分异构体Astilbin和Isoastilbin。在三种体外化学抗氧化实验中,5种芪类化合物均有一定的抗氧化效果。在一定浓度范围内(10μg/mL-200μg/mL),随化合物浓度的增加抗氧化效果增强。其中化合物Astilbin的体外化学抗氧化活性最强,而(+)-Cis-ε-Viniferin的体外化学抗氧化活性最弱。在CAA实验中,5种芪类化合物在细胞内的抗氧化效果差异显著。其中,Astilbin的细胞抗氧化活性最强,而Isoastilbin的细胞抗氧化效果最差。荧光定量PCR实验的结果表明,除(+)-Cis-ε-Viniferin外的4种芪类化合物均对ABAP诱导产生的活性氧自由基有很好的清除作用,能够有效的减少细胞凋亡的发生。结论:本试验的研究结果表明新疆酿酒葡萄茎是芪类化合物的来源之一,可以从中分离出具有良好抗氧化活性的芪类化合物,且化合物Astilbin具有极强的抗氧化活性,在今后的研究中应该对其活性进行进一步的探究。
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