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目的：富集人食管癌细胞系Eca109中的肿瘤干细胞，探讨p75NTR表达特点与Eca109肿瘤干细胞的关系。方法：食管癌细胞系Eca109细胞调整细胞密度为l×105个/ml，置于无血清培养基中培养14天获得肿瘤干细胞球。HE染色观察细胞球细胞的形态；Western-blot技术检测p75NTR、p75ICD的表达；细胞免疫荧光技术检测干细胞标记物p75NTR、p75ICD、Oct-4、Sox2、Lin28、Nanog在细胞球细胞中的表达及定位。应用MTT法和平板克隆试验检测并比较p75NTR或p75ICD核阳性表达的细胞球细胞与常规培养的Eca109细胞的体外增殖情况；使用不同浓度化疗药物作用于细胞球细胞和常规培养的Eca109细胞48小时后MTT法检测细胞存活比例；Transwell方法检测细胞的侵袭能力。结果：（1）Eca109细胞在无血清培养基中培养3天后逐渐形成悬浮生长的细胞球，培养至第14天可予以传代，第二代细胞球形成时间要比第一代快且形态规则。将细胞球细胞制备细胞爬片进行HE染色观察细胞形态：细胞呈圆形或短梭形、核大位于细胞中央、细胞质偏少。（2）检测干细胞标记物p75NTR、p75ICD、Oct-4、Sox2、Lin28、Nanog的表达和定位，细胞球细胞中p75NTR、p75ICD、Oct-4、Lin28定位于细胞核，而在常规培养的Eca109细胞中大部分定位于细胞质，仅有少部分定位于细胞核。Sox2、Nanog在细胞球细胞中均定位于细胞质与常规培养的细胞无明显差别。（3）Western-blot结果显示p75NTR在细胞球细胞中的表达低于常规培养的Eca109细胞；细胞球细胞核蛋白中p75ICD的表达明显高于细胞质蛋白，而常规培养的Eca109细胞核蛋白中p75ICD表达量却低于细胞质蛋白。（4）MTT结果显示细胞球细胞增殖率明显高于常规培养的Eca109细胞，差异具有统计学意义(P<0.001)。（5）细胞球细胞接种于培养板中培养14天后形成细胞数大于50个的克隆形成率明显高于Eca109细胞，差异具有统计学意义(P<0.05)（6）使用不同浓度的卡铂、紫杉醇和丝裂霉素分别作用于细胞球细胞和常规培养的细胞48小时，细胞球细胞的存活细胞数量比常规培养的Eca109细胞多，差异具有统计学意义。（7）Transwell结果显示48小时后细胞球细胞比常规培养Eca109细胞的侵袭能力强，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：1.干细胞标志物p75NTR、p75ICD、Oct-4、Lin28可能是分选食管癌干细胞的重要标记物，p75NTR、p75ICD可能是特异性的标记物。2. p75NTR或p75ICD、Oct-4、Lin28核阳性的细胞可能是食管癌干细胞。