双菌功能口含片的研制及工艺设计

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产朊圆酵母因其富含保肝功能的谷胱甘肽及B族维生素和蛋白质而被学术与企业所关注。经过紫外诱变,获得适宜保健食品生产的高产(2.656%)菌株TUV-44,通过单因子试验和正交试验法确立其生产谷胱甘肽的最佳培养基成分和液体发酵条件。虽然与基因工程株相比谷胱甘肽产量略低,但由于基因工程株存在潜在对人体健康的危险性,所以,不能应用于保健食品生产。羊肚菌自古即为名贵的食、药两用真菌,由于人工栽培产量低,环境条件要求苛刻,而野生资源又很有限,故利用现代液体发酵生物工程技术实现大规模的工业化生产,不仅大幅度提高菌丝体的积累量,同时产品的标准化程度高。但目前对其主要功能成分-真菌多糖的产品开发未见报道。采用单因素优选和正交试验法,研究确定产朊圆酵母生产谷胱甘肽(GSH)的最佳培养基为:1.5%葡萄糖、1.0%蛋白胨、0.15%半胱氨酸、0.05%谷氨酸、0.05%甘氨酸、0.125% MgSO4,及产朊圆酵母摇瓶发酵中pH、装液量、接种量、初糖浓度和补糖方式以及温度、时间、转速,对GSH发酵的因素条件的影响。结果表明,GSH发酵适宜的初始pH和装液量分别为7.0和250ml锥形瓶内装液量50ml。接种量10%时菌体干重和GSH含量较高,补糖浓度对GSH发酵有较大的影响,从第四小时开始补糖,间隔2h连续三次,每次使发酵液的葡萄糖浓度增5g/L,超过30g/L的总糖浓度将减少胞内GSH含量。得出一种以控制比生长速率为目的的摇瓶补糖方法,在总糖浓度为25g/L下, 30℃, 120r/min,发酵24h,最终生物体积累量和胞内GSH积累分别达到 8.58g/L和 13.55mg/g,发酵液内GSH总量达到118.5mg/L。可使GSH总产量达到菌体干重2.656%通过摇瓶正交试验研究了羊肚菌液体发酵的条件,选出最佳培养基配方:蔗糖2%、玉米粉2%、尿素0.5%、豆饼粉1%、无机盐KH2P04 0.05%、MgSO4 0.05%、FeSO4 0.1%、ZnCl2 0.1%,确立最佳摇瓶培养条件22℃、pH7.0、120r/min ,10%接种量,装量100ml/250ml,时间5d,可以获得胞内多糖含量为18.47%、胞外多糖浓度0.78g/L的发酵液和菌丝体17.0 g/L。在此基础上,通过10L—自控发酵罐进行了分批发酵,与摇瓶结果相符。以现代营养学为理论基础、进行产品配方研制、使产品达到医食壁合。以现代口含片生产技术进行生产,最大限度保持产品天然功能有效成分和色、香、味,充分发挥微生物的各种潜能,使生产达到理想的优质、高产、低耗水平,而获得最佳投入产出效益。由羊肚菌和圆酵母生产的双菌口含片,口感细腻,芳味独特,堪称现代社会的营养滋补佳品。
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