ACTN-4基因在口腔鳞状细胞癌表达及对SCC15细胞凋亡的影响研究

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目的:探讨ACTN-4在口腔鳞状细胞癌组织表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:qPCR检测ACTN-4在口腔鳞状细胞癌组织中的mRNA表达;免疫组化检测ACTN-4在口腔鳞状细胞癌组织蛋白表达情况;将口腔鳞状细胞癌SCC15细胞分为空白组(细胞无特殊的处理)、NC组(细胞中转染脂质体2000及NC siRNA)及si-ACTN-4(细胞中转染脂质体2000及设计合成的ACTN-4特异性siRNA),Western blotting检测转染siRNA 48h后细胞ACTN-4、Bcl-2、Bax、AKT和p-AKT表达,流式细胞术检测细胞凋亡率;MTT法检测转染siRNA 24h、48h和72h的细胞增殖情况。结果:(1)ACTN-4在口腔鳞癌组织mRNA表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。(2)ACTN-4定位于口腔癌细胞的胞浆或胞膜,以胞浆或胞膜中呈现出明显的黄色或棕褐色的阳性细胞,其阳性细胞表现出弥漫性分布;(3)ACTN-4特异性siRNA转染SCC15细胞48h后,si-ACTN-4组ACTN-4蛋白表达明显低于空白组(P<0.05)。(4)si-ACTN-4转染SCC15细胞24h,si-ACTN-4组细胞OD值与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05),si-ACTN-4转染SCC15细胞48h和72h,si-ACTN-4组细胞OD值与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(5)si-ACTN-4转染SCC15细胞48h,si-ACTN-4组细胞凋亡率明显高于空白组(P<0.05)。(6)si-ACTN-4转染SCC15细胞48h,与空白组比较,si-ACTN-4组p-AKT和Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显升高(P<0.05),三组间AKT蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)结论:ACTN-4在口腔鳞癌组织中阳性表达,抑制ACTN-4表达可明显降低口腔鳞癌SCC15细胞增殖,诱导口腔鳞癌SCC15细胞凋亡,下调p-AKT和Bcl-2表达,上调Bax表达。抑制ACTN-4表达可能通过抑制AKT信号通路的活化从而抑制口腔鳞癌SCC15细胞增殖及诱导细胞凋亡,可能作为口腔鳞癌靶向治疗的潜在靶点。
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