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器官移植长期以来受到捐献数量不足以及移植排斥的影响,组织工程作为再生医学的重要工具,目的就是为了解决器官移植的不足。然而传统组织工程使用生物可降解材料或注射细胞悬液的方法也有诸多不足,生物可降解支架的生物相容性需要验证,某些生物支架会造成植入部位附近组织发炎增生,生物可降解支架的降解也会引起炎症反应。其次,支架降解会留下一定空间,而这些空间通常会被增殖的细胞以及大量的胞外基质填满,但是过多的胞外基质以及支架降解残留物又会造成组织纤维化,从而产生病变。因此,研究者们创造出新的组织工程的方法来制备组织,即使用温敏性高分子材料制备温敏性细胞培养基底,并以此制备细胞片应用于组织工程中。本文首先探讨气道平滑肌细胞的原代培养与鉴定,接着通过使用聚异丙基丙烯酰胺以普通细胞培养皿为基础制备温敏性细胞培养基底,并在其上培养气道平滑肌细胞,以观察温敏性培养基底对气道平滑肌细胞生长的影响以及其调控细胞的黏附行为,并通过温敏性培养基底制备气道平滑肌细胞片。主要目的是掌握大鼠气道平滑肌的原代培养和鉴定以及温敏性细胞培养皿的制备工艺,并为将来更深层次的研究打下基础。本文主要实验结论如下:①使用水和异丙醇作为溶剂制备异丙基丙酰胺溶液,结果发现以水作为溶剂的异丙基丙酰胺溶液经照射后无法达到温敏性培养基底的标准,原因是异丙基丙烯酰胺在水里的溶解度过低,通过聚合无法使异丙基丙烯酰胺与普通培养皿表面形成良好的共价连结。②利用西南医院辐照中心γ射线以及四川原子能研究院电子加速器对涂覆有异丙基丙烯酰胺单体的普通细胞培养皿进行辐照。结果发现,使用γ射线辐照能够制备聚异丙基丙烯酰胺水凝胶,但无法制备温敏性培养基底。原因是γ射线辐照所需时间过长,导致溶剂异丙醇溶剂已挥发完全。相反,电子加速器辐照则很好地解决了这个问题。③以异丙醇为溶剂配制不同质量浓度比例40%,45%,50%,55%的异丙基丙酰胺溶液,结果发现45%质量浓度下制备的温敏性培养基底细胞黏附性最佳。另外,200μL为制备温敏性培养基底的最佳加入量。④在温敏性细胞培养基底培养气道平滑肌细胞以及肝癌细胞,结果发现肝癌细胞生长状态与在普通培养皿上生长状态相同,但是气道平滑肌细胞在温敏性培养基底上的生长明显慢于在普通细胞培养皿上。⑤通过温敏性培养基底调控气道平滑肌细胞与肝癌细胞的黏附行为。结果发现,气道平滑肌细胞可以通过降低温度从温敏性培养基底上脱落,而肝癌细胞无法通过降低温度从温敏性培养基底上脱落。