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目的1.建立一种操作更加简单、成活率高、生物相似性高的口腔鳞状细胞癌动物模型,为口腔肿瘤实验研究奠定基础;2.采用光动力学疗法( photodynamic therapy,PDT )联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)缓释剂治疗口腔鳞癌,研究其在促进肿瘤细胞凋亡中是否具有协同和强化作用。方法采用局部植入瘤块法建立100只兔Vx-2口腔鳞癌动物模型,成功后随机分为5组:A组,空白对照组;B组,静脉给药组;C组,缓释剂组;D组,PDT组;E组,缓释剂联合PDT组。A组:不予任何处理;B组:全麻后耳缘静脉注射2.5mg/ml氟尿嘧啶溶液30ml(75mg),注射速度控制为0.5ml/min;C组:将5-FU缓释剂用专用植药针按时钟4个位点植入到肿瘤中,单点给药不超过20mg,总剂量为75mg;D组:先从耳缘静脉注入稀释为1mg/ml的HPD0.3mg/kg,避光养殖24h后麻醉。照射时术区外用生理盐水纱布覆盖保护,光纤末端距离肿瘤约2cm,波长630nm,光斑覆盖肿瘤,激光功率密度为200mW/cm3,照射10min,能量密度为100J/cm2;E组:先局部植入5-FU缓释剂(方法剂量同C组)然后予以激光照射,照射前24h静脉注射HPD。接下来对各实验组兔子精神、饮食、活动等行为学进行观察,连续五周测量肿瘤体积,五周后处死动物取肿瘤组织做组织学观察和免疫组化、流式细胞仪等来评价肿瘤抑瘤率、生长状态、肿瘤细胞的凋亡率及肿瘤组织中p53基因蛋白表达情况来初步研究PDT联合5-FU缓释剂的疗效,各组数据比较用SPSS11.0统计软件进行统计分析,以P<0.05为具有显著性差异。结果1. Vx-2肿瘤移植成功率较高,成瘤率百分之百,操作简单,具有可重复性。2.治疗后连续观察五周并测肿瘤体积,发现治疗后第1周各组间肿瘤体积无明显差异,第2周起空白对照组、静脉给药组和PDT组肿瘤生长较缓释剂组和联合治疗组较快。联合治疗组兔子精神状态、饮食、活动等均较其他各组稍显优势。3.治疗后第五周观察并计算抑瘤率得:静脉给药组(39.9±15.9)%;缓释剂组(73.8±22.3)%;PDT组(50.6±21.8)%;联合治疗组(93.6±19.5)%,联合治疗组抑瘤率明显低于其他各组,与其他各组间比较具有显著性差异(P<0.05)。4. HE染色镜下观察肿瘤组织为鳞状细胞癌,联合治疗组较其他组肿瘤细胞增殖能力下降、核分裂像罕见、细胞大量死亡或凋亡、出现空泡样变、核固缩等现象。5.免疫组化测得各组p53基因蛋白阳性表达率为:空白对照组(60%)、静脉给药组(50%)、缓释剂组(30%)、PDT组(45%)、联合组(15%),联合组明显低于其他组,各组间比较具有显著性差异(P<0.05)。6.流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率结果:空白对照组(5.05±1.19)%、静脉给药组(11.81±0.89)%、缓释剂组(25.80±13.78)%、PDT组(20.32±11.24)%、联合组(32.51±15.32)%,联合组明显高于其他各组,与其他组间比较具有显著性差异(P<0.05),缓释剂组高于静脉给药组及空白对照组,组间比较均具有显著性差异(P <0.05),PDT组与空白对照组和静脉给药组比较具有显著性差异(P<0.05),而缓释剂组与PDT组比较则无显著性差异(P>0.05)。结论采用Vx-2肿瘤组织块移植法建立口腔鳞状细胞癌操作简单,成活率高,是一种较好的可供口腔肿瘤实验研究的动物模型。在口腔鳞癌治疗上5-FU缓释剂较常规静脉给药在维持抗瘤有效浓度,治疗疗效上具有一定的优势,与PDT联合应用时在抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡上较其单独应用效果显著。因此我们可以得出5-FU与PDT联合应用可能成为治疗口腔鳞癌的一种新的临床治疗方法。