前言 放疗是肺癌治疗的重要手段之一。肺癌的发生、发展及预后与癌基因的激活，抑癌基因的失活密切相关。动物实验证实，改变基因的表达情况能明显地提高放射治疗预后。多基因间还可协同诱导产生放射抵抗性或者放射敏感性，从而影响放射治疗的结果。 p53和Bcl-2基因在肺癌中有较高的表达率。本实验就是要探讨p53及Bcl-2的表达与非小细胞肺癌放射治疗预后的关系。 实验材料与方法 一、实验材料 收集中国医科大学放疗中心1995-1000年收治的接受单纯性放疗的非小细胞肺癌58例。所有病例均为经过纤维支气管镜病理活检确诊的放射治疗的患者。全部标本均经10％福尔马林固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片，常规HE染色。 全部患者均应用Siemens直线加速器治疗。选用X射线，15MV，Dt=66-68GY/33-34f/45-49d。SSD=100cm，剂量率为2Gy/min。 二、实验方法 采用链霉素-生物素过氧化酶复合物(S-P)免疫组化方法 每张切片由两名病理科医师双盲随机选择10个高倍视野(×400)，观测P53，Bcl-2蛋白表达情况。以细胞核中出现棕黄色颗粒为 P53蛋白阳性；以细胞浆中出现棕黄色颗粒为仇－2蛋白阳性染色。 应用SPSS10．0软件进行KaPfan－Meter生存分析，绘制生存曲线，并用吨－rnk法进行检验，判定P53及Bcl－二的过表达与放射治疗预后是否有相关性。进一步应用Cox－Reession进行多因素分析，确定P53及h－2的过表达是否为判断放射治疗预后的独立相关因素。 实验结果 ＊ p53蛋白表达 P53蛋白阳性产物位于细胞核内，呈棕黄色颗粒。58例非小细胞肺癌中，有32例呈阳性表达，阳性率为55．17％。 2．BCI—2蛋白表达 BCI—2蛋白表达产物位于纲胞浆中，呈棕黄色颗粒。58例非小细胞肺癌中，有27例呈阳性表达，阳性率为46．55％。 3．p53表达情况与生存期相关关系分析 P53阳性患者的平均生存时间为 14．36。0．97（月入 p53阴性患者的平均生存时间为 18．60 fi．49（月人 经过 LOG回归计算，有统计学意义h＝0．030卜炉3阳性表达的患者的预后较差。 4．BCI—2表达情况与生存期相关关系分析 BCI—2阳性患者的平均生存时间为 14．39。1．18（月LBCI－Z阴性患者的平均生存时间为 17．89。1．26（月人 经过 LOG回归计算，有统计学意义h＝0．04 l）：BCI－2阳性表达的患者的预后较差。 5．应用单因素分析证实 年龄h二 0．328）和性别h＝0．588）与放射治疗后患者的生 ·2·存期无关。 6．Cox－Re邵ssion多因素分析结果显示 P53和仇－2的阳性羡达是判断放射治疗预后的独立相关因素（p＝0．019）。 讨 论 非小细胞肺癌的放射治疗的疗效个体差异很大。近年来随着好生物学理论及其技术在医疗研究中的不断应用，证实放射线引起的细胞凋亡可能依赖于p53基因蛋白的介导，并受仇－2基因蛋白水平调控，因此P53基因及BCI－2基因表达有可能作为判定肿瘤放射治疗预后的参考指标。 本实验应用人 P53及 BCI－2基因产物蛋白单克隆抗体对 58例接受放射治疗的非小细胞肺癌患者 p53及仇－2基因表达情况进行了回顾性研究，发现 PS 3与h－2在非小细胞肺癌组织中有较高的阳性表达，与对照组相比有统计学意义h＜0．05人此组数据与文献报道的研究数据相近。说明P53及执－2的阳性表达与非小细胞肺癌的发生有关，可能是支气管上皮转变成癌的重要因素。虽然都是接受放射治疗的非小细胞肺癌，但患者的预后却不同。实验发现P53及伽－2的阳性表达与非小细胞肺癌患者放射治疗后的生存期呈明显的负相关，是预测非小细胞肺癌患者放射治疗预后的较好的指标。 P53的主要生物学功能是引起细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡，促进细胞分化。除GI期阻滞外砰3还可以使细胞阻滞在GZ期。此外，促进细胞终末分化可能是P53起抑癌基因作用的又一个机制。 p53基因阳性表达降低放射敏感，影响患者的预后的可能的原因是：p53基因于扰DNA受损伤的细胞GI期抑制，使其继续 ·3·进人 S期，其机制可能有两方面的作用：一方面是 P53基因突变增加 DNA修复酶的活力；另一方面 p53蛋白本身参加 DNA修复。P53基因阳性表达将会减弱甚至阻断放射线对DNA的损伤，起到降低放射敏感性的作用。 Hwang JH等人研究68名非小细胞肺癌患者 Bcl－2的表达得出结论：在治疗前的病理切片上伽－二有阳性表达预示着放射治疗的预后不良。与本实验的结论相同。 BCI－二的表达与预后呈负相关可能是与趾—2的生物学特性有关，BCI—2的主要生物学功能是抑制细胞凋亡，延长细胞的寿命，这就增加了其它癌基因表达的机会，同时它还保护发生基因突变的细胞长期生存而不凋亡，并能增加细胞对多种凋亡刺激因素的抵抗性，阻止细胞死亡的最后通路，从而调?