楝科植物中杀虫活性成分的分离提取及活性测定

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楝科植物作为植物源杀虫剂,具有对有害生物高效、对非靶标生物安全、易分解、不污染环境等优点,具有广阔的发展前景。为探索天然生态农药的开发利用,本文对楝科植物中的杀虫活性成分进行了提取、分离和纯化,对麦蚜的生物活性进行了初步研究。采用分光光度法测定楝科植物中皂苷的含量。经比较,川楝树皮中的皂苷含量最高,为36.3 mg/g。采用传统的热水浸提法、热回流浸提法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法,对川楝树皮中的皂苷进行提取。通过单因素实验和正交设计实验,对提取条件进行优化。结果表明,以乙醇为溶剂提取2次,最佳工艺条件为:提取料液比为1:10,提取时间为4 h,乙醇浓度80%,提取温度为75℃。经KD-1大孔吸附树脂进一步分离纯化,制备出纯度较高的楝科植物皂苷。通过单因素实验和正交设计实验,对微波法提取川楝素的条件进行优化。结果表明,以乙醇为溶剂提取2次,最佳工艺条件为:提取料液比为1:30,提取时间为10 min,乙醇浓度为70%,提取功率为595 W。再经氯仿萃取分离和多次重结晶,得到白色针状结晶。薄层层析结果显示出两个绿色斑点,为川楝素的两个同分异构体。采用高效液相色谱法,测定其川楝素纯度为98.63%。高效液相色谱法检测川楝素的加样回收率为98.87%,RSD为0.94%,该方法稳定性较好,精密度和准确度较高。将川楝树皮粗提物、川楝皂苷、香椿皂苷、川楝素纯化物,对麦蚜的作用效果进行了初步研究。室内毒力测定结果表明,以上四种提取物对麦蚜均具有一定的触杀、拒食、胃毒作用,且提取物的拒食、胃毒效果优于触杀效果。川楝树皮粗提物对麦蚜的毒力回归方程为:y=1.2318+1.3921x,处理48 h后,LC50为509.1 mg/L;川楝皂苷对麦蚜的毒力回归方程为:y=2.9150+1.1576x,处理48 h后,LC50为63.26 mg/L;香椿皂苷对麦蚜的毒力回归方程为:y=1.6946+1.6539x,处理48 h后,LC50为99.11mg/L;川楝素对麦蚜的毒力回归方程为:y=4.3044+1.5851x,处理48 h后,LC50为2.75 mg/L。其杀虫活性顺序为川楝素>川楝皂苷>香椿皂苷>川楝粗提物。
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