【摘 要】
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莲子芯是成熟莲子种仁中的绿色胚芽及胚根,人们常以泡茶饮用,富含有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血压、抗炎等多种生理功能活性物质。莲的品种也丰富多样,且广泛分布于我国的江苏、江西、浙江、湖北、湖南、福建等地。莲子芯的主要化学成分为生物碱类和黄酮类物质,其中生物碱类成分具有抗癌、抗病毒、保护血管内皮细胞、抗氧化、降血糖等生物活性功能,而黄酮类成分具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血脂等作用。已有研究表明莲子芯的主
【基金项目】
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湖南省自然科学基金-面上项目（2021JJ31075）,夏佛塔苷通过MAPK信号通路抑制DSS诱导的小鼠结肠炎症及其分子机理研究,2021-2022； 长沙市自然科学基金（kq2014275）；
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莲子芯是成熟莲子种仁中的绿色胚芽及胚根,人们常以泡茶饮用,富含有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血压、抗炎等多种生理功能活性物质。莲的品种也丰富多样,且广泛分布于我国的江苏、江西、浙江、湖北、湖南、福建等地。莲子芯的主要化学成分为生物碱类和黄酮类物质,其中生物碱类成分具有抗癌、抗病毒、保护血管内皮细胞、抗氧化、降血糖等生物活性功能,而黄酮类成分具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血脂等作用。已有研究表明莲子芯的主要黄酮类活性成分为夏佛塔苷（schaftoside,SS）。因此本研究选取夏佛塔苷为研究对象,评价其在动物和细胞炎症模型以及动物降脂模型中的抗炎和降脂作用,并进一步探讨夏佛塔苷发挥抗炎作用的途径机制。1.夏佛塔苷抑制结肠炎症的功能评估及机理研究本实验采用葡聚糖硫酸钠（sodium dextran sulfate,DSS）建立急性溃疡性结肠炎症模型,分析夏佛塔苷的体外抗炎活性,并通过使用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导RAW264.7巨噬细胞建立炎症细胞模型,评估夏佛塔苷抗炎的具体分子机制。据动物实验结果表明,夏佛塔苷能够缓解小鼠在建立结肠炎症模型后体重下降、毛色变差、粪便不成形、肠道出血、疾病活动指数（disease activity index,DAI）升高的情况。观察小鼠的组织表观形态,小鼠脾脏肿大、结直肠缩短肿大的情况在夏佛塔苷的干预后也有明显好转。通过组织病理症状分析可知,夏佛塔苷能够明显抑制DSS诱导后小鼠的炎性细胞浸润情况,缓解结肠组织内结肠细胞、隐窝严重丢失,杯状细胞耗竭,粘膜糜烂,粘膜下层水肿。同时夏佛塔苷能够下调结肠组织内的白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）、白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和环氧合酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）的在蛋白水平上的表达量。以上结果表明,夏佛塔苷能够改善DSS对于小鼠结肠的组织损伤并抑制炎性因子表达。据细胞实验结果表明,不同的夏佛塔苷浓度梯度处理后,细胞中丝裂原活化蛋白激酶家族（mitogen-activated protein kinase,kinases 1/2,ERK1/2）、c-Jun N端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）和p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38 MAPK）的磷酸化水平较LPS组呈现剂量依赖性下降。显示夏佛塔苷发挥抗炎作用可能与抑制MAPK信号通路关键靶基因的蛋白表达相关。2.夏佛塔苷缓解高脂血症的功能评估及其机理研究为了探究夏佛塔苷的降脂功效及发挥作用的分子机制,采用高脂饮食（high fat diet,HFD）诱导小鼠建立高脂血症肥胖动物模型。实验结果表明,夏佛塔苷能够抑制高脂饮食诱导的小鼠体重增加、肝脏脾脏病变及肿大。测量血清中血脂四项总胆固醇（total triglyceride,TC）、甘油三酯（total triglyceride,TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL-C）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL-C）的生化指标结果显示,夏佛塔苷干预后,小鼠血液中TC、TG和LDL-C的表达水平下调,而HDL-C生化水平上调。对小鼠肝脏及附睾脂肪垫组织进行组织病理学分析可知,夏佛塔苷干预保护后,肝脏组织中炎症浸润、肝脏细胞肿大状况减轻,且能够抑制脂肪细胞增大。用分子实验探究夏佛塔苷对脂代谢关键基因mRNA表达的影响。结果表明,夏佛塔苷能够在mRNA水平上,抑制过氧化物酶体增殖剂激活受体（peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs）中PPAR-α表达降低和PPAR-γ的表达升高,下调高脂模型建立后乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase,ACC）、脂肪酸合酶（fatty acid synthase,FASN）、固醇调节元件结合蛋白-1c（sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c）、白细胞分化抗原36（cluster of differentiation 36,CD36）的mRNA表达。并下调CD36、FASN、ACC、沉默信息调节因子 1（silent information regulator 1,SIRT-1）和SREBP-1c在蛋白水平上的表达。综上所述,夏佛塔苷能够抑制脂代谢异常和小鼠组织受损,从而缓解HFD诱导的高脂血症,其保护作用可能是通过激活PPAR通路从而激活下游脂代谢靶基因发挥降脂作用。本研究旨在评估夏佛塔苷的抗炎及降脂生物活性,及其发挥作用的分子机制,为夏佛塔苷应用于功能性保健食品提供理论依据。
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