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目的了解医院内鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类等常用抗菌药物的耐药情况以及碳青霉烯类耐药基因的分布特征,分析医院内碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistantAcinetobacter baumnnii,CRAB)的克隆播散规律,分析医院内患者 CRAB感染的临床特征及危险因素,为临床上鲍曼不动杆菌感染的预防控制提供依据。方法(1)选取2014~2016年辽宁省某三甲医院检出的94株不动杆菌,对其相应患者的基本临床信息进行整理分析。(2)应用VITEK2-Compact全自动微生物分析仪对不动杆菌进行MIC的药敏试验。(3)常见碳青霉烯酶编码基因检测和流行播散规律分析①对鲍曼不动杆菌复合体进行鉴定,检测其中鲍曼不动杆菌的数量;对鲍曼不动杆菌进行耐药基因检测,检测其是否携带blaOXA-23-like基因、blaOXA-24-like基因、blaOXA-51-like基因、bldOXA-58-like基因、blaIMP-like基因、blaVIM-like基因和blaNDM-1基因等常见碳青霉烯酶编码基因,使用PCR和基因测序方法对blaOXA-24-like基因的亚型进行检测。②使用REP-PCR和MLST的方法对鲍曼不动杆菌进行基因分型,对医院内检出的鲍曼不动杆菌的同源性进行分析。③查阅国内外鲍曼不动杆菌相关文献,针对鲍曼不动杆菌携带的blaOXA-24-like基因进行分析,整理MLST的结果,应用eBURST软件对分析blaOXA-24-like基因的ST型和地理位置进行分析。(4)根据鲍曼不动杆菌的药敏情况,将94株菌株分为碳青霉烯耐药组和非碳青霉烯耐药组,应用Logistic回归分析的方法分析医院内患者感染CRAB的危险因素。结果(1)研究对象基本信息分析结果显示,94名患者以男性为主(71.3%),52.1%患者为75~89岁老人,患者主要来自ICU(46.8%),94名患者感染的不动杆菌大多数分离自痰标本(80.9%)。(2)药敏试验结果显示,94株不动杆菌对大多数药物耐药,对碳青霉烯类抗菌药物(亚胺培南或美罗培南)耐药的有70株(74.5%),其中对亚胺培南的耐药率为66.0%,对美罗培南的耐药率为74.5%,对头孢吡肟耐药率相对较低为30.4%。药敏结果显示,94株不动杆菌对呃拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、庆大霉素、头孢他啶、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均高于50.0%。94株不动杆菌对米诺环素和多粘菌素的敏感率较高,分别为92.6%和96.8%。ICU患者和非ICU患者检出的Ab对碳青霉烯类抗菌药物耐药率有统计学差异(P<0.05),不同年龄段、感染部位和感染结局患者的Ab对碳青霉烯类抗菌药物耐药率无统计学差异(P>0.05)。(3)常见碳青霉烯酶编码基因检测和流行播散规律分析①94株不动杆菌中鲍曼不动杆菌共89株,基因3型不动杆菌5株。89株鲍曼不动杆菌中,blaOXA-23-like基因检出率为34.8%,blaOXA-24-like基因检出率为43.8%,blaOXA-58-like基因检出率为1.1%,89株鲍曼不动杆菌全部检出blaOXA-51-like基因,检出率为100%。5株基因3型不动杆菌未检出任何耐药基因。本研究所有不动杆菌未检出blaNDM-1基因、blaIMP-like基因和blaVIM-like基因。所有blaOXA-24-like基因的鲍曼不动杆菌进行进一步检测,基因序列比对后,确定其为blaOXA-72型。②按照80%的相似系数可将81株鲍曼不动杆菌分为10个类型(A~J),所有CRAB属于A类和B类,MLST结果显示,所挑选的13株菌均为ST 2型。③ST 2型为目前Ab中blaOXA-24-like基因的主要ST型别,该ST型主要来自克罗地亚、法国、瑞典、波兰、利比亚、阿尔及利亚、德国、以色列、西班牙和中国,其大部分为欧洲国家,其次为亚洲和非洲。本次研究中检出的blaOXA-24-like基因均属于ST 2型,其为全球范围内主要流行型。(4)单因素分析结果显示,入住ICU、使用呼吸机、中心静脉置管、留置胃管、使用过碳青霉烯类抗菌药物、使用青霉素类抗生素和使用抗菌药物的数量为医院内CRAB感染的危险因素(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,留置胃管(OR=10.321,CI:1.690~63.034,P=0.011),使用碳青霉烯类药物(OR=21.613,CI:2.249~207.674,P=0.008)和使用青霉素类药物(OR=15.267,CI:2.481~93.944,P=0.003)是医院内患者感染CRAB的独立危险因素(P<0.05)。结论医院内鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药率较高,对多粘菌素和米诺环素耐药率低,ICU的菌株耐药率高于其它科室。医院内碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌检出率较高,且全部检出blaOXA-24-like基因或blaOXA-23-like基因为主,碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌多见于ICU,耐药率明显高于其他科室,blaOXA-24-like基因多在欧洲国家报道,在国内,本研究首次出现blaOXA-24-like基因检出率较高的现象,blaOXA-24-like基因和blaOXA-23-like基因分型结果显示其为同一克隆型,医院内鲍曼不动杆菌以克隆传播为主。医院内患者感染碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌的危险因素为留置胃管、使用碳青霉烯类抗生素和青霉素类抗生素。