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目的：近年来研究证明,氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)在高胆固醇血症相关性肾脏疾病发病中起重要作用。体外实验发现ox-LDL可通过降低蛋白激酶B (protein kinase B, PKB/Akt)活性诱导足细胞损伤。作为Akt上游调节因子,粘着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK),在最近体内外研究中,已被证实能介导足细胞损伤。FAK为一种分子量为125kDa的非受体型酪氨酸蛋白激酶,在细胞的分裂增殖、粘附和迁移等细胞过程中发挥重要作用。同时,FAK还是一种接头蛋白,其上载有蛋白分子结合位点,可结合包括c-Src、Rho GTP酶、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase, p38MAPK)等下游信号分子并参与各种生物信号转导。P38MAPK作为为丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)家族成员之一,具有产生炎症介质、介导细胞分裂与凋亡,以及参与调节细胞骨架稳定性等重要作用,并与高脂血症引起的内皮、巨噬细胞等多种类型细胞损伤密切相关。因此,本研究旨在探讨ox-LDL对体外培养条件下足细胞的毒性机理,FAK/p38MAPK信号通路在ox-LDL诱导的体外足细胞损伤中的作用,以及其发生的机制。方法：1.LDL的氧化：LDL的氧化修饰采用硫酸铜氧化法：LDL的修饰程度测定则采用硫代巴比妥酸反应物质(thiobarbituric acid reactive substances, TBARS)法。2.TAE226的配制：将TAE226溶于二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)配制成30mmol/l浓度的储存液,保存于20℃。用于处理细胞时,以DMSO进一步稀释储存液并加入培养基中,计算加入量调整培养基内DMSO终浓度至0.1%(V/V)。3.细胞培养及分组：体外培养永生化小鼠足细胞系(由哈佛医学院Peter Mundel教授惠赠)。在33℃条件下,于用I型胶原包被的培养瓶内,以含有10%血清及青链霉素的RPMI1640+10U/ml重组小鼠Y-干扰素培养基培养以促进足细胞增殖；在37℃不加γ-干扰素的条件下培养至少14天促进足细胞分化,并检测足细胞分化成熟指标WT-1。将分化成熟的足细胞分为5组进行处理：正常组,高脂组(ox-LDL20μg/ml), p38siRNA组,Cont-siRNA组,FAK抑制剂组(TAE2260.1μM)。4.足细胞损伤的测定：检测足细胞正常指标nephrin和WT-1表达,及损伤标识desmin与vimentin的表达。5.FAK及p38MAPK磷酸化的测定：检测足细胞在ox-LDL诱导前后FAK及p38MAPK的表达变化及其关系,并观察不同处理组足细胞的形态变化。结果：1.ox-LDL诱导体外足细胞损伤。以ox-LDL刺激足细胞24小时后,与正常组相比较,足细胞WT-1及nephrin蛋白及mRNA水平均明显下调(P<0.05),而损伤性指标desmin与vimentin的表达水平则显著上升(P<0.05)。2.FAK在ox-LDL诱导的足细胞损伤过程中激活。在用ox-LDL培养的足细胞中,FAK被激活,即磷酸化p-FAK水平较正常组明显增高(P<0.05),总FAK表达无明显变化(P>0.05)。且这一变化与ox-LDL诱导的足细胞损伤是一致的。3.FAK通过活化p38MAPK参与ox-LDL诱导的足细胞损伤。与正常组相比,ox-LDL刺激了足细胞中p38MAPK活性升高,即p-p38MAPK水平升高(P＜0.05),这与FAK的激活及足细胞损伤是一致的；通过p38siRNA进行p38基因敲低,p38MAPK与p-p38MAPK含量均减少(P＜0.05),同时观察到足细胞WT-1及nephrin的蛋白发mRNA表达均较高脂组升高(P＜0.05),损伤性标志desmin与vimentin的表达则被下调(P<0.05),而对FAK的激活无明显影响(P>0.05)。4.抑制FAK的活化可改善ox-LDL诱导的足细胞损伤。应用FAK抑制剂TAE226,足细胞neplirin与WT-1蛋白及mRNA水平较高脂组上调(P＜0.05),desmin与vimentin则下调(P＜0.05),同时伴有p-p38MAPK水平显著下降(P＜0.05)。结论：FAK通过激活p38MAPK介导ox-LDL所诱导的体外足细胞损伤；而通过抑制FAK磷酸化可显著缓解足细胞这一损伤。