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目的:脓毒症是一种由感染引起的系统性宿主反应改变所引发的生理、病理和生化异常综合征。目前脓毒症的诊疗水平有了很大的提高,但仍是重症监护病房(ICU)患者死亡的主要原因。因此早期识别脓毒症及早期治疗是降低脓毒症死亡率的关键。本论文在脓毒症miRNA芯片结果的基础上,验证miRNA在脓毒症中的差异表达,分析其与脓毒症炎性因子的相关性,探讨其是否可以作为一种脓毒症诊断的新标志物,为脓毒症的发病机制及早期预警提供参考。 方法:以32例脓毒症患者和32例健康体检者为研究对象。根据P≤0.05同时FC(abs)>5.0的标准从前期miRNA芯片结果中筛选出脓毒症外周血表达差异的miRNA。提取外周血总RNA,通过RT-PCR检测64例入组者差异miRNA的表达量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中IL-6、IL-21、MCP-1浓度,分析miRNA与脓毒症炎症因子的相关性。应用特征曲线(ROC)评估差异表达miRNA对脓毒症的诊断价值。 结果:(1)根据筛选标准从前期miRNA基因芯片结果中筛选出显著差异表达的9种miRNA:miRNA-3663、miR-625、miR-491、miR-592、miR-3591、miR-6514、miR-6881、miR-1260b、miR-4694。其中miR-625低表达,miRNA-3663、miR-491、miR-592、miR-3591、miR-6514、miR-6881、miR-1260b、miR-4694均高表达。(2)RT-PCR结果表明,较健康组相比,脓毒症组中miRNA-3663表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.005),与基因芯片结果一致。而miR-625、miR-491、miR-592、miR-3591、miR-6514、miR-6881、miR-1260b、miR-4694差异无统计学意义(P>0.05)。(3)ELISA实验数据显示,sepsis组外周血较正常组炎症因子(IL-6、IL-21、MCP-1)高表达,具有显著差异性(P<0.0001)。(4)直线相关性分析结果显示,sepsis组miR-3663与IL-6、IL-21、MCP-1表达水平的相关系数(r2)分别为0.695、0.777、0.638,表明miRNA-3663表达与IL-6、IL-21、MCP-1表达中度正相关(P<0.0001)(5)ROC曲线分析显示,miRNA-3663、IL-6、IL-21、MCP-1在脓毒症的ROC曲线下面积(AUC)依次为1.000、0.917、0.951、0.995,说明miRNA-3663在脓毒症中的诊断价值最佳。 结论:miRNA-3663在脓毒症患者外周血中较正常组显著高表达;miRNA-3663的表达与外周血中炎症因子(IL-6、IL-21、MCP-1)的含量中度正相关;脓毒症中与炎症因子(IL-6、IL-21、MCP-1)相比,血清miRNA-3663诊断价值最佳,可作为早期诊断脓毒症的新分子标志物。本课题为寻找脓毒症早期诊断及治疗提供新的依据,并为研究脓毒症临床诊治相关分子标志物奠定基础。