论文部分内容阅读
人类摄食的蛋白质经消化道酶作用后,主要是以低聚肽形式被吸收,某些低聚肽不仅能提供人体生长、发育所需的营养物质,还具有防病治病、调节人体生理机能的功效。菜籽肽的氨基酸含量多且平衡良好,并含有多种生物活性。菜籽肽已成为目前植物源活性肽研究领域的新热点。本研究通过柱层析系统、液质联用、傅立叶-拉曼光谱、红外光谱、分子模拟等近代最新技术,系统地研究了菜籽肽的理化性质、分离纯化、生物活性及空间构象,结果如下:采用Alcalase和Flavourzyme分步水解得到菜籽肽并对其理化性质进行研究,通过葡聚糖凝胶层析获得了RSP-1、RSP-2、RSP-3和RSP-4共4个组分。对菜籽肽各级分的清除自由基作用和抑制血管紧张素转化酶(ACE)作用表明,RSP-4的清除ABTS自由基作用(TEAC值=0.24)和抑制ACE作用(IC50=0.19 mg/mL)最强,而其清除DPPH作用(IC50=0.18 mg/mL)则仅低于RSP-1(IC50=0.125 mg/mL)和RSP-2(IC50=0.125 mg/mL)。采用液质联用、傅立叶-拉曼光谱、红外光谱、分子模拟等技术对RSP-4构象进行了深入研究与分析。通过液质联用技术确定RSP-4的分子量为977Da,结合数据库检索可推测其氨基酸序列为PFDSYFVC。拉曼光谱和红外光谱解析不但验证了质谱所得的氨基酸组成信息,拉曼光谱更进一步表明其二级空间结构为β-转角。通过分子模拟技术对RSP-4三维空间结构进行预测。按照RSP-4序列进行多肽合成,并对其生物活性进行进一步研究。该研究对菜籽肽的生物活性和构象进行了系统深入的研究,其结果为天然活性肽在生物医药中的应用提供了科学依据和理论基础,同时为植物源活性肽的开发与应用提供了新的思路、借鉴。