银杏叶提取物对皮肤光损伤及银屑病干预作用与机理

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紫外光是最常见的环境污染因素之一,但人们常忽视紫外光带来的危害,对其防护不到位。长期过量照射紫外光,导致皮肤晒伤、加速老化甚至引发皮肤癌。同时,紫外光是银屑病的环境诱因之一,且过量的紫外光还会加剧了银屑病的病情。银屑病作为一种常见的炎症介导的皮肤疾病,除了给患者带来了皮肤外观问题,也会导致失眠、关节炎、高血压等并发症,让患者承受巨大的精神压力。随着现代医学与生物技术的发展,作为传统中药的银杏叶被发现具有良好的抗炎、抗氧化效果,有修复紫外光(Ultraviolet B,UVB)带来的光损伤与治疗银屑病的潜在可能性。因此,本文通过建立细胞光损伤模型、UVB动物光损伤模型与咪喹莫特银屑病动物模型,对银杏叶提取物修复光损伤与抑制银屑病的作用进行初步的研究。银杏叶提取物对皮肤光损伤的修复作用的研究。活性氧是造成光损伤的重要因素,首先,通过体外抗氧化实验对银杏叶提取物的抗氧化效果进行评价,结果表明:银杏叶提取物抑制1,1-二苯基-2-苦肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的IC50为0.12 mg/mL,抑制2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis,ABTS)的IC50为0.15 mg/mL,表现出良好的抗氧化活性。采用角质形成细胞(Hacat)与成纤维细胞(NIH-3T3)评价紫外光照射后加入50–250μg/mL银杏叶提取物的细胞活力,结果表明:银杏叶提取物对UVB损伤后的Hacat和NIH-3T3细胞有明显的修复效果。采用昆明小鼠建立的UVB损伤模型评价银杏叶提取物的修复作用,通过对老鼠背部皮肤进行观察,苏木素-伊红染色与马松染色分析皮肤结构,发现银杏叶提取物能降低UVB造成的表皮异常增厚,促进胶原蛋白的合成。对皮肤进行炎症相关因子(白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子-α)免疫组织化学法分析、实时定量聚合酶链式反应与免疫蛋白印迹实验,进一步发现银杏叶提取物能抑制炎症因子的表达,上调I型胶原与III型胶原的表达水平,抑制核因子κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路表达来缓解皮肤的光损伤。银杏叶提取物对银屑病缓解作用的研究。银杏叶提取物对皮肤光损伤所致炎症通路具有抑制作用,其对银屑病作用的研究引起了课题组的兴趣。采用咪喹莫特诱导Balb/c小鼠银屑病的模型评价表明:银杏叶提取物与阳性药他克莫司有效抑制银屑病的红肿与鳞屑情况,降低经皮失水率。50 mg/mL银杏叶提取物达到最好的抑制效果,表皮厚度下降,可显著抑制群集分化淋巴细胞(Cluster of differentiation 8+T cell,CD8+T)、环氧酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)在表皮层的表达。通过酶联免疫吸附法和实时荧光定量聚合酶链式反应对其作用机理进行进一步的研究。50 mg/mL银杏叶提取物抑制银屑病模型相关的炎症因子白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的表达,对银屑病相关因子干扰素-α/β(Interferon-α/β,IFN-α/β)、白介素-17(Interleukin-17,IL-17)的表达水平进行了下调。银杏叶提取物可能通过调控IFN-α/β转录水平与CD8+T细胞增殖情况抑制部分炎症因子的表达,起到缓解银屑病的作用。
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