纳米环丙沙星对铜绿假单胞菌及其生物被膜形成的抑制作用研究

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铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)是一种常见的条件致病菌,其形成的生物被膜(Biofilm,BF)是产生耐药性的重要原因之一。生物被膜的致密三维结构使得抗生素不能充分进入生物被膜内部,从而使抗生素只能作用于生物被膜表面的细菌,而无法抑制和杀灭生物被膜内部的细菌,导致感染的久治不愈。因此,解决抗生素对BF的低渗透性是治疗生物被膜引起的感染性疾病的关键。具有体积效应、表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应的纳米抗生素颗粒存在克服和改善抗生素的低渗透性的潜能。本研究以水溶性较好的壳聚糖氯化物(Chitosan chloride,CS)、β-环糊精硫酸盐(p-cyclodextrin sulfate,S-P-CD)为载体,以盐酸环丙沙星(ciprofloxacin hydrochloride,Cip)为模式药物,通过离子凝胶技术制备了方法简单,稳定性较好,载药率较高的纳米载药体系。旨在能有效地抑制铜绿假单胞菌生物被膜的形成,控制铜绿假单胞菌引起的感染。对于载药体系优化实验,通过Zeta电位仪、扫描电镜和紫外分光光度法等表征方法研究表明,纳米载药体系在CS、S-β-CD和Cip均为lmg/ml,搅拌时间为4Hr,pH值在5.5时,制备的纳米环丙沙星颗粒的大小均一,性质稳定,显微形貌呈规则的圆球形,其平均粒径为142.9±1.41nm,Zeta电位为+62.47±0.28mV,包封率为51.21%。对于纳米抗生素抑制细菌和生物被膜实验,通过结晶紫染色法、扫描电镜和激光共聚焦显微镜等方法和手段,结果发现,与未包裹的环丙沙星相比较,纳米环丙沙星对浮游铜绿假单胞菌无明显的抑制和杀伤作用,但其对生物被膜的形成有明显抑制作用,对成熟的生物被膜也有一定的清除效果,主要在对生物被膜疏密度和厚度的影响方面存在显著性差异。本研究制备的以壳聚糖和p-环糊精硫酸盐为载体的纳米载药体系是一种比较好的纳米载药体系。在治疗铜绿假单胞菌及其生物被膜引起的感染性疾病方面存在潜在的适用性。这将为临床上克服由铜绿假单胞菌及其生物被膜引起的久治难愈的慢性感染性疾病提供有力的理论支撑。
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