细胞免疫治疗对肝癌患者CXCR1、CXCR2、CXCL8表达的影响

来源 :安徽理工大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wangfuqun
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目的:探讨细胞免疫治疗对肝癌患者外周血及局部病灶组织CXCR1、CXCR2、CXCL8表达的影响。方法:筛选典型的肝细胞肝癌患者35例,根据肝脏部位电子计算机断层扫描(computerized tomographic scanning,CT)特征以及2010年美国癌症联合会公布的肝癌的TNM分期标准将其分为T2期24例,T3期11例;酶联免疫吸附法分别测定患者血清中CXCL8、GP-73含量;以中性粒细胞分离液密度梯度分离纯化外周血中性粒细胞,在PBNs中提取总RNA,后逆转录成cDNA并配制PCR体系进行扩增,凝胶电泳检测肝癌患者体外周血及局部病灶组织CXCR1、CXCR2、CXCL8mRNA含量,以lgcDNA/lgGAPDH比值代表其最终mRNA水平。选取8例接受CIK细胞治疗患者,进一步观察T2、T3期患者CXCR1/2、CXCL8 mRNA含量变化。结果:肝癌患者血清内CXCL8、GP-73含量分别是(315.66± 100.85)pg/mL、(214.84±49.11)ng/mL,与正常对照组相比均有显著性差异(P<0.0001);外周血PBNs内 CXCR1 mRNA、CXCR2 mRNA、CXCL8mRNA 分别为(1.1333 ±0.0551)lgcDNA/lgGAPDH、(0.8863 ±0.0605)lgcDNA/lgGAPDH、(1.2007±0.073)lgcDNA/lgGAPDH,与正常对照组相比均有显著性差异(P<0.0001);CIK细胞免疫治疗后患者外周血PBNs内CXCR1mRNA、CXCR2mRNA、CXCL8mRNA分别为(0.87±0.05631gcDNA/lgGAPDH、(0.76±0.0428)lgcDNA/lgGAPDH、(1.095±0.064)lgcDNA/lgGAPDH,与正常对照组相比均有显著性差异(P<0.0001);肝癌活检组织苏木精-伊红染色法结果显示:肝癌细胞体积明显扩大,核形状多变且不规则,核分裂增多,细胞互相重叠,分辨不清,瘤组织内可见丰富的新生微血管;PCR检测14例手术切除组织CXCR1/2、CXCL8 mRNA含量与正常对照相比,差异均具有统计学意义(z=6.528,P<0.0001;t=9.583,P<0.0001;t=7.832,P<0.0001)。T2期肝癌患者的CXCR1/2、CXCL8 mRNA含量分别是(0.4462±0.0984)、(1.0509±0.1262)、(0.9032±0.1095)lgGAPDH/lgcDNA,T3 期肝癌患者的 CXCR1/2、CXCL8mRNA含量分别是(0.8296±0.1628)、(1.1361±0.1888)、(1.2649 ±0.2357)lgGAPDH/lgcDNA,统计学分析显示 T2、T3 期肝癌患者CXCR1和CXCL8 mRNA表达差异有显著性(t=4.341,P=0.0010;t=2.893,P=0.0135),T2、T3期肝癌患者CXCR2表达差异未见差异性(t=0.8215,P=0.4274)。部分切除肝癌组织HE染色见较多含淡染的红细胞的管腔,提示病灶组织产生新生的血管。结论:(1)肝癌患者血清CXCL8、GP-73含量升高,且PBNs内CXCL8和CXCR1/2 mRNA水平增加,提示血清中高表达的CXCL8与PBNs内CXCL8 mRNA转录翻译有关。(2)细胞免疫治疗可下调PBNs内CXCL8、CXCR1/2的过度表达,降低过度分泌CXCL8所致的炎症反应。(3)肝癌患者局部病灶组织CXCR1、CXCR2、CXCL8表达增加,提示PBNs参与局部病灶炎症应答,促进肿瘤细胞侵袭转移。(4)抑制CXCR1、CXCR2过度表达,不仅可降低局部炎症反应,还能抑制肿瘤细胞向周边组织侵袭,似可作为抗肝癌细胞生长的新型分子靶位。
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