目的:调查兰州大学第二医院医院感染革兰阴性杆菌谱及其耐药性,对经确认的产超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)菌株进行耐药基因分型。 方法:采用MicroScan-4和K-B法,对兰州大学第二医院2000年—2004年的院内感染革兰阴性杆菌进行鉴定和药物敏感试验,检测分离菌对16种抗生素的耐药性,利用“whonet5.3”软件对耐药性结果进行录入及分析。通过表型初筛法(K-B)、表型确认法(K-B)、三维试验确认产ESBLs菌株,采用PCR对ESBLs基因进行分型。 结果:1、兰州大学第二医院革兰阴性杆菌所致医院感染中,大肠埃希菌比例最高,占34%,阴沟肠杆菌、不动杆菌比例呈上升趋势。细菌的耐药率在逐年上升,其中阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌,耐药性高于其它革兰阴性杆菌(p<0.05),对第三代头孢菌素耐药率分别达到60-80%、40-70%,对亚胺培南耐药的菌株日益增多,甚至出现了“全耐药”的鲍曼不动杆菌。敏感性较高的抗生素有丁胺卡那、派拉西林/他唑巴坦、亚胺培南。 2、本院2005年5月～9月从医院感染临床标本分离革兰阴性杆菌175株中,检出产ESBLs菌49株,分布于大肠埃氏希菌、克雷伯菌、阴沟肠杆菌、弗劳地枸椽杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌,其中,主要是阴沟肠杆菌(17/49),其次是大肠埃氏希菌(15/49)。单种菌株产ESBLs率前三位是阴沟肠杆菌(17/30,56.6%),大肠埃氏希菌(15/40,37.5%),肺炎克雷伯(6/24,25.0%)。各病区中神经科产ESBLs分离率最高(32.7%)。 3、按照NCCLS/CLSI推荐的表型确证法检测阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍