甲烷化与短程硝化耦合工艺及PAH降解反应器构建过程中微生物群落和功能的进化研究

来源 :河南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzg31142003
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本论文追踪研究了间歇运行式膨胀颗粒污泥床反应器(SEGSB)与实现短程硝化的SBR反应器集成(SEGSB-SBR)构建过程中以及以菲、芘为唯一碳源驯化活性污泥的SBR反应器构建过程中不同时期的微生物群落和功能的动态进化过程,为阐明系统废水处理机制和提高废水处理效率提供理论依据。研究成果主要包括如下几方面:(1)短程硝化SBR反应器的成功构建和与氮转化相关功能基因的定性定量研究:SBR反应器控制DO在0.5-1mg/L,在常温、低COD条件下实现低氨氮废水的短程硝化作用,系统的NH4+-N氧化率为87.0%、NAR为66.8%;对成功实现短程硝化的SBR反应器中氮转化的功能基因构建克隆文库并进行实时定量分析:结果表明AOB amoA基因和NOB nxrB基因序列均具有较高的多样性,amoA基因序列分属于亚硝化单胞菌属、亚硝化螺菌属,大部分属于亚硝化球菌属。nxrB基因序列集中于硝化细菌属的Nitrobacterhamburgensis、Nitrobacter winogradskyi、Nitrobacter alkalicus以及Nitrobacter vulgaris四个种。amoA基因的的定量数据高于nxrB基因,在细菌中占较大比例,正因为amoA基因的优势从而造成了NO2-的积累,证实了SBR反应器成功实现了短程硝化作用。(2)SEGSB反应器的构建和SEGSB-SBR耦合工艺的成功运行:SEGSB反应器控DO在0.5mg/L以下,在温度30℃~35℃,进水NH4+-N为80mg/L,COD从500mg/L增至4500mg/L条件下成功富集了产甲烷菌,系统COD去除率达93.98%, NH4+-N去除率为10.26%-13.65%;将稳定运行的短程硝化SBR反应器和甲烷化SEGSB反应器进行耦合集成,形成具有甲烷化、反硝化和ANAMMOX功能的集成工艺。在进水COD为4500mg/L,NH4+-N为90mg/L-170mg/L,内部体积交换比在20%-40%条件下耦合反应器成功运行。系统NH4+-N去除率为69.11%-71.45%, TN浓度为去除率为68.64%-71.07%,整个过程中短程硝化SBR反应器运行良好,氨氧化率为91.04%-95.62%。(3)集成反应系统中微生物群落的动力学变化研究:运用高通量测序及RT-PCR技术对SEGSB及SEGSB-SBR工艺中微生物群落的动力学进化进行追踪研究,结果表明变形菌门(Proteobacteria)、绿弯菌门(chloroflexi)一直是优势菌,β-变形菌纲(Betaproteobacteria)、δ-变形菌纲(Deltaproteobacteria)在变形菌中一直存在并占优势。古菌全部为广古菌门(Euryarchaeota)的产甲烷菌(Methanogens),结构单一。定量数据表明,在整个运行过程中细菌的数量占优势,古菌的数量发生了较大的变化,出现了先增加后降低的趋势。古菌的多样性明显少于细菌,说明细菌具有巨大的功能冗余保证系统稳定运行。(4)降解菲、芘的SBR反应器的构建、运行及PAH降解基因的动力学变化研究:SBR反应器控制DO在5-8,在室温条件下,控制进水COD浓度145.83mg/l-151.44mg/l,菲或芘浓度50mg/L,反应器运行过程中菲驯化阶段出水COD去除率为17.57%-76.26%,菲的去除率为39.74%-92.40%,pH5.13-9.43。芘驯化阶段COD去除率为34.44%-78.74%,芘的去除率为74.42%-90.07%,pH为4.10-7.41;运用RT-PCR技术研究了反应器构建过程中细菌数量与PAH降解基因的变化趋势,结果表明在细菌16S rRNA基因数呈增加趋势,从1010增加到1012,同时PAH-RHDα-GN基因与PAH-RHDα-GP基因的数量也呈现增加趋势,且PAH-RHDα-GN基因占优势;构建了菲、芘稳定降解时期PAH降解基因的克隆文库,基因分析结果表明,功能基因PAH-RHDα具有较高的多样性,其功能类群主要分属于分歧杆菌属等11个属,假单胞菌是革兰氏阴性菌中的优势菌群,分歧杆菌是nidA基因的主要拥有者,其数量在B时期呈现了显著的增加这为成功驯化具有PAH降解功能的微生物提供了理论依据。
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