天麻抗真菌蛋白基因导入甘蓝型油菜的研究

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油菜 (Brassica napus L.)在我国是一种十分重要的经济作物也是主要的油料作物之一。近年来优质高产的“双低”(菜籽油中芥酸含量低,菜籽饼中硫代葡萄糖甙含量低)油菜的育成,提高了油菜的经济价值,拓宽了油菜的用途。真菌病害是造成油菜产量和品质大幅度下降的主因,“双低”油菜品种由于硫苷含量低,致使植株对病原的感病性偏高,因而当病害发生时,“双低”油菜的产量和品质就会遭受巨大损失。 天麻 (Gastrodia elata B1.)是一种能与真菌共生的植物,因其球茎外层存在着一种能强烈抑制真菌生长的物质——天麻抗真菌蛋白(Gastrodia Antifungal Protein,GAFP)。2000年王义琴等从天麻次生块茎中成功地克隆了编码GAFP的基因,并且通过原核表达证明该基因所编码的产物具有抑菌活性。 本研究以甘蓝型油菜 (Brassica napus L.)“双低”品种westar为实验材料,以下胚轴为外植体,利用根癌农杆菌(LBA4404)介导的方法将天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因导入其中。经共培养、抗生素筛选、生根获得了转化植株。对所获得的转化植株进行PCR、基因组Southern和RT-PCR检测结果表明,外源的GAFP基因已经整合入油菜基因组中。论文中还对影响农杆菌介导法转化效率的主要因素进行了分析讨论。
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