寡糖特异性麦芽糖酶的产生与性质研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:rabeenzhu
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寡糖特异性麦芽糖酶(Maltogenase)可以切开麦芽低聚糖底物的α-1,4糖苷键,释放出葡萄糖和麦芽糖。可用于工业生产高纯度麦芽糖。本实验筛选出一株寡糖特异性麦芽糖酶生产菌M136,并探索大孔吸附树脂对麦芽低聚糖的分离条件,以麦芽低聚糖作为底物,建立了测酶活力的方法。对菌株M136进行产酶条件的优化和酶学性质的研究。得到的主要结论如下:1.经过静态吸附和动态实验,确定能够处理的料液体积及洗脱液体积,考察了料液浓度、流速等因素对树脂吸附性能的影响,确定了最佳纯化参数。通过实验得出:以流速为1.0 mL/min,料液浓度为50 mg/mL的组合上柱,对麦芽糖浆中麦芽低聚糖的纯化效果最好。2.菌株M136最佳产酶条件为:麦芽低聚糖作为碳源,碳源的质量浓度为50me/mL,以酵母浸粉作为氮源,氮源的质量浓度为2 mg/mL,发酵时间为24 h,温度为37℃,培养基初始pH为6.5。3.硫酸铵饱和度在40%-70%之间得到的沉淀物中含有大部分的寡糖特异性麦芽糖酶活力。本实验条件下寡糖特异性麦芽糖酶的最适作用温度为45℃,而在60℃以上催化活性较低。该酶热稳定性好,在50-C以下可保温较长时间,酶活保留较高。该酶在较广的pH值范围表现出酶活力,最适酶反应pH为6.5,pH值在6-7.5之间酶活力相对稳定。本实验就几种金属离子对酶反应的影响进行研究,结果表明K+,Mg2+, Mn2+对酶有激活作用;Fe3+, Ca2+有抑制作用;Cu2+, Zn2+, C r3+有强烈的抑制作用。
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