目的:本课题研究目的在于通过网络药理学的方法预测中药黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)总皂苷抗凝血的作用靶点和机制,并通过体外抗凝血指标检测实验和动物实验对所预测作用靶点机制进行进一步验证。方法:乙醇热回流法提取黄花倒水莲总皂苷(PTS),高效液相色谱法(HPLC)测定黄花倒水莲(PFH)皂苷A含量,紫外分光光度法(UV)测定PTS含量。网络药理学方法收集FPH所有化学成分及其作用靶点并筛选分析预测出PTS作用靶点和通路。FeCl3诱导大鼠颈总动脉血栓模型实验验证PTS抗凝血、抗血栓作用,测定PTS对经典体外抗凝血参数活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)活性的影响及凝血因子/辅因子FIIa和FXa活性的影响初步确定其抗凝血作用机制。结果:该批次PTS中,黄花倒水莲皂苷A含量为1.673%,总皂苷含量为37.091%,经网络药理学预测PTS的抗凝血作用靶点为凝血因子II(FII)和血小板活化因子受体(PTAFR)。动物实验表明PTS可显著抑制Fe Cl3诱导的大鼠颈总动脉血栓形成,高剂量PTS组的血栓形成抑制率为42.68%,血栓形成面积为43.51%。体外抗凝血实验表明PTS可显著剂量依赖性地延长质控血浆APTT、TT,对PT无影响,在0-2mg/m L范围内其倍增人质控血浆APTT、TT所需浓度分别为0.36mg/mL和0.14 mg/mL,说明PTS是通过作用于内源性凝血途径以及共同凝血途径来发挥其抗凝血作用的。凝血因子/辅因子检测实验进一步揭示PTS是通过抑制FIIa即凝血酶活性来发挥其抗凝血作用,其IC50为85.88±12.50μg/mL。结论:体内体外实验证实黄花倒水莲总皂苷具有抗凝血、抗血栓作用,其抗凝血作用机制为抑制FIIa活性。基于成分靶点网络药理学分析和预测,与实验结果基本一致,主要是对活化的FII起作用。