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目的:研究非对称性二甲基精氨酸(asymmetrical dimethylarginine, ADMA)对人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblasts, HSF)衰老的影响及其可能机制。方法:1.用高效液相色谱(HPLC)法测定自然衰老和光老化皮肤组织和成纤维细胞中ADMA的浓度。2.原代培养人皮肤成纤维细胞,MTT比色法评价ADMA对HSF增殖的影响,确定最佳药物处理浓度。3.不同浓度ADMA(10,30,501μM)作用于HSF,48小时后,用p-半乳糖苷酶染色试剂盒检测衰老相关p-半乳糖苷酶活性,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)浓度,免疫印迹法(western-bolt)检测磷酸化p38MAPK,衰老相关蛋白P16、MMP-1的改变。4.预先加入P38抑制剂SB203580(10μM)或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10μM)1小时后,再加入ADMA(50μM)处理,上述同样的方法检测以上指标。结果:1.年老组皮肤组织和成纤维细胞中ADMA含量均明显高于儿童组(P<0.05),同一人中曝光部位皮肤组织中ADMA含量明显高于非曝光部位(P<0.05),UVA照射后HSF中ADMA的含量明显升高(P<0.05)。2. ADMA能抑制人皮肤成纤维细胞的增殖,且随浓度增加,抑制能力也相应增强,IC50=51.47±1.013μM。3.不同浓度ADMA(10,30,50μM)处理HSF48小时后,细胞密度减少、细胞变大变圆,p-半乳糖苷酶染色率、衰老相关蛋白P16均随ADMA浓度的增加而增加(P<0.05),细胞出现衰老表型。4.不同浓度ADMA(10,30,50μM)处理HSF后,ROS水平随浓度增加而增加,磷酸化p38MAPK,MMP-1蛋白亦随浓度逐渐增加(P<0.05)。5.P38抑制剂SB203580(10μM)能显著下降ADMA所致的p-半乳糖苷酶染色率、P16蛋白及MMP-1蛋白的升高;抗氧化剂NAC(10μM)亦能明显下降ADMA所致的p-半乳糖苷酶染色率、P16蛋白、ROS浓度、磷酸化p38MAPK及MMP-1蛋白的升高。结论:1.自然衰老和光老化皮肤组织及成纤维细胞中ADMA的含量显著上升,ADMA在皮肤衰老过程中起重要作用;2. ADMA能通过促进ROS的产生、激活p38MAPK磷酸化、从而促进MMP1的生成而诱导人皮肤成纤维细胞的衰老。