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目的探讨还原型谷胱甘肽对大鼠肝星状细胞（HSC）-T6的增殖、活化和Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法1.选择大鼠肝星状细胞珠（HSC-T6）作为研究对象，分别采用浓度为1μg/ml、0.1μg/ml、0.01μg/ml、0.001μg/ml脂多糖(LPS)作用于HSC-T6，作用24h、48h、72h后，应用噻唑兰（MTT）比色法检测HSC-T6增殖的变化，从而确定LPS活化HSC-T6的最适作用浓度及作用时间。2.分别采用浓度为0mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L、10mmol/L的还原型谷胱甘肽（GSH）作用于经0.1μg/mlLPS活化的大鼠HSC-T6，24h后应用MTT比色法检测HSC-T6增殖；放射免疫法检测细胞上清液中透明质酸（HA）及Ⅳ型胶原的含量；免疫细胞化学染色图像分析HSC-T6中a-SMA的表达；实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测HSC-T6中Nrf2mRNA、HO-1mRNA的表达；免疫细胞化学技术检测HSC-T6中Nrf2、HO-1蛋白的表达。结果1.MTT法检测不同浓度LPS对HSC-T6增殖的影响：不同浓度LPS与HSC-T6共同培养24h后，随着浓度（0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml）的增加，细胞增殖（106.83±8.17、106.96±8.12、125.39±7.58）呈上升趋势，当LPS浓度达1.0μg/ml时，细胞增殖（109.78±5.03）下降；随着作用时间（48h、72h）的延长，细胞增殖(98.67±5.68、93.63±4.54、95.34±5.91、93.76±5.36)、(94.15±4.48、93.51±8.72、90.62±9.10、92.13±8.84)呈下降趋势。24h组各组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.MTT法检测不同浓度GSH对HSC-T6增殖的影响：GSH与HSC-T6共同培养后，未见不良反应，0mmol/L的GSH作用组HSC-T6增殖活性（0.88±0.03）较空白对照组(0.82±0.01)增加，差异有统计学意义；随着GSH浓度的增加，细胞增殖活性(0.79±0.02、0.74±0.03、0.70±0.02、0.62±0.01)降低，同0mmol/L的GSH作用组(0.88±0.03)比较差异有统计学意义；细胞增殖活性与GSH浓度呈指数关系（y=1.024e-0.02x，R2=0.825，F值为73.098，P<0.05）。3.放射免疫法检测不同浓度GSH对HSC-T6合成HA及Ⅳ型胶原的影响：0mmol/L的GSH作用组HA及Ⅳ型胶原表达（415.74±14.52、251.47±14.06）明显增加，与空白对照组（199.27±10.89、77.92±9.67）比较差异有统计学意义；随着GSH作用浓度的增加，HA(372.98±11.01、320.76±16.37、284.46±13.17、239.08±16.95)及Ⅳ型胶原（191.27±17.49、163.85±16.26、133.03±13.14、103.31±12.52）的表达逐渐减少，同0mmol/L的GSH作用组（415.74±14.52、251.47±14.06）比较差异有统计学意义；HA及Ⅳ型胶原的表达与GSH浓度呈指数关系（y=392.5e-0.05x，y=214.0e-0.08x；R2分别为0.913，0.839；F值分别为100.984，63.011；P<0.05）。4.免疫细胞化学染色图像分析HSC-T6中a-SMA的表达：0mmol/L的GSH作用组a-SMA的表达（3.52±0.06）明显增加，与空白对照组（0.90±0.02）比较差异有统计学意义；随着GSH作用浓度的增加，a-SMA的表达（2.97±0.09、2.23±0.06、1.57±0.05、1.22±0.07）逐渐减少，同0mmol/L的GSH作用组（3.52±0.06）比较差异有统计学意义；a-SMA的表达与GSH浓度呈指数关系（y=3.101e-0.10x，R2=0.898，F值为73.098，P<0.05）。5.实时荧光定量PCR检测不同浓度GSH对HSC-T6内Nrf2mRNA、HO-1mRNA表达的影响：0mmol/LGSH组Nrf2mRNA、HO-1mRNA表达（1.21±0.11、1.25±0.09）较空白对照组（1.00±0.00、1.00±0.00）明显增加，差异有统计学意义；1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L、10mmol/LGSH组与0mmol/LGSH组比较，Nrf2mRNA(1.51±0.06、1.92±0.08、2.69±0.07、3.43±0.07)、HO-1mRNA(1.43±0.08、1.73±0.07、2.10±0.08、2.64±0.07)表达逐渐增加，差异有统计学意义；Nrf2mRNA、HO-1mRNA的表达与GSH浓度呈指数关系（y=1.401e0.099x，y=1.364e0.071x；R2分别为0.888，0.908；F值分别为453.730，191.507，P<0.05）。6.免疫细胞化学技术检测不同浓度GSH对HSC-T6内Nrf2、HO-1蛋白表达的影响：不同浓度GSH作用组细胞均可见胞核内棕红色颗粒沉积，呈Nrf2阳性表达，细胞浆中无阳性染色；与胞核内浅棕红着色的空白对照组比较，GSH各处理组大部分细胞胞核内呈较深棕红着色，且随着药物浓度增加，Nrf2在胞核表达逐渐增强，甚至棕褐色着色。不同浓度GSH作用组细胞均可见胞浆内棕色颗粒沉积，呈HO-1阳性表达，但程度有所不同,空白对照组细胞胞浆内显色呈微棕色，而GSH各处理组大部分细胞胞浆内呈较深棕黄着色，且随着药物浓度增加，HO-1在胞浆表达逐渐增强，甚至呈棕褐色着色。结论1.GSH可抑制HSC-T6增殖、活化。2.GSH可减少HSC-T6细胞外基质（ECM）HA及Ⅳ型胶原的分泌。3.GSH抑制HSC-T6增殖、活化，减少HSC-T6细胞外基质（ECM）的分泌，其机制与GSH对HSC-T6中Nrf2/HO-1信号通路调控有关。