【摘 要】
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近年来发现新近分离的原癌基因c-Mpl受体的配基具有刺激巨核细胞的增殖与分化,促进血小板的生成与释放的功能,被认为是巨核细胞系唯一的生理性特异的正调控因子,称为血小板生
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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近年来发现新近分离的原癌基因c-Mpl受体的配基具有刺激巨核细胞的增殖与分化,促进血小板的生成与释放的功能,被认为是巨核细胞系唯一的生理性特异的正调控因子,称为血小板生长因子(Thrombopietin TOP).该实验应用基因工程的方法克隆和表达了人的TPO(hTPO),并对其生物学活性进行了研究.首先从人6个月龄胎肝中提取细胞总RNA,以mRNA为模板经逆转录获得hTPO的cDNA.以套式PCR的方法扩增获得hTPO基因.将其亚克隆至真核细胞瞬时表达载体质粒pCMV4、稳定表达载体质粒RC/CMV和原核细胞表达载体质粒pBV220中,得到了重组表达质粒RC/CMV/TPO和pBV220/TPO.分别转染真核细胞COS-7、CHO和大肠杆菌DH5α,得到了良好的表达.经生物学的研究表明,rhTPO在体外能够有效地刺激巨核细胞和红细胞集落的生长;在体内,能够减轻照射对小鼠外周血小板及骨髓造血祖细胞的影响,促进其早期恢复,是临床治疗骨髓组织损伤引起的血小板减少的有希望的生物治疗药物.
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