急性早幼粒细胞白血病MRD的血清蛋白质组学特征研究

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目的:分析急性髓系白血病(Acutemyeloidleukemia,AML)患者血清蛋白质指纹图谱,寻找AML特别是M3患者即急性早幼粒细胞白血病血清中表达有显著差异的血清蛋白质标志物,发现能监测AML-M3微小残留疾病(Minimalresidualdisease,MRD)的标志蛋白并建立M3MRD诊断模型。方法:采用德国Bruker公司生产的铜螯合磁珠(MB-IMACCu)纯化血清蛋白质后,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对110例AML患者(其中非M3初发45例,M3初发36例,M3缓解29例)和32例健康对照组的血清进行蛋白质质谱分析,结果采用Bruker公司的FlexAnalysis3.0软件以及ClinProTooLs2.2软件进行图谱分析和统计学处理,构建分类模型并筛选AML初发、M3初发及M3MRD差异蛋白。结果:在分子量1000~10000Da范围内,AML初发、AML非M3初发、AML-M3初发与健康组血清比较分别能检测到44种、45种、34种蛋白质质谱峰强度差异有统计学意义(p<0.000001),其中差异最显著的三个肽段的质荷比(m/z)是4642Da、7764Da、9289Da,均低表达,可以作为AML初发的标志蛋白峰。M3初发/AML非M3初发模型,与AML-M3初发/健康对照模型比较分析,其中差异最显著(p<0.0001)的两个肽段质荷比(m/z)2723Da、6189Da可作为M3的标志分子量蛋白。M3初发/M3缓解(CR)模型,与AML-M3初发/健康对照模型比较分析,其中差异最显著(p<0.000001)的3个肽段的质荷比(m/z)是4642Da、7764Da、9289Da,可以作为M3MRD的标志蛋白。进一步用4642Da和9289Da标志蛋白峰建立M3MRD诊断模型并进行外部盲法验证,结果表明,8例患者中,6例可以正确诊断。结论:利用铜螯合磁珠-基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术可从血清中筛选出AML初发、AML-M3初发及M3MRD潜在的标志蛋白,可以用于M3MRD的动态检测,4642Da和9289Da可能是M3MRD较好的蛋白标志物。
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