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目的:研究针对自分泌运动因子(Autotaxin,ATX)的小干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌细胞ATX基因表达的影响,探讨ATX在乳腺癌治疗的应用前景。方法:实验分三组:阴性对照组,空白质粒转然组,干扰片段转染组。参考人黑色素瘤ENPP2基因序列,设计合成ATX-siRNA序列(正义链:5’-GGU CCU CCU ACA GUG CUA UTT-3’ ,反义链:5’-AUA GCA CUG UAG GAG GAC CTT3’)及随机阴性对照序列(正义链5’-GGU CUC CCA AAC GGU CUA UTT-3’ ,反义链:5’-AUG AGC CGU GAU GAG GAC CTT-3’)。在阳离子脂质体的介导下转染人乳腺癌细胞MCF-7,转染后48h后观察转染效率,收集细胞,各组分别提取RNA和蛋白,(1)半定量RT-PCR检测转染后ATX mRNA表达;(2)western blot检测转染后ATX蛋白的表达;(3)干扰序列在阳离子脂质体的介导下转染人乳腺癌细胞MCF-7,转染后48h后观察转染效率并收集细胞,测定肿瘤细胞穿透matrigel的能力,检测肿瘤细胞侵袭力的变化;通过t检验和方差分析比较各组数据间的差异。结果:体外合成的ATX-siRNA在转染乳腺癌MCF-7细胞48h后荧光显微镜观察,转染率达60%。(1)半定量RT-PCR分别测定三组细胞的ATX-mRNA含量:阴性对照组(0.965±0.076),空白质粒转染组(1.097±0.184),干扰片段转染组(0.546±0.721),P<0.05;(2)Western blot检测三组细胞ATX蛋白表达:阴性对照组(0.713±0.027),空白质粒转染组(0.680±0.052),干扰片段转染组(0.501±0.023),P<0.05;(3)Tanswell小室法检测三组细胞侵袭力改变:阴性对照组(141.2±6.693),空白质粒转染组(130.0±4.690),干扰片段转染组(26.0±1.532),P<0.05。通过t检验和方差分析各组数据,干扰片段转染组与空白质粒转染组和阴性对照组比较(P<0.05),差异有显著性。结论:ATX-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株ATX基因和蛋白的表达,降低人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭力。