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本文对家蚕含染色质域基因的鉴定与MSL-3同源体和Bm-MOF基因的功能进行了研究。结果如下:
1.染色质域基因在家蚕基因组中具有同源体。应用EST证据和RT—PCR鉴定基因在家蚕中都有表达。
2.克隆了家蚕MSL-3同源基因:Bm-ms13和Bm-mrg-15,序列已在国际核酸数据库GenBank上登录,登录号分别为DQ887343和DQ888173,基因的cDNA长度分别为:2356 bp和1113 bp。克隆的开放阅读框长度分别为1665 bp和1020 bp,分别编码554和339个氨基酸残基,均含有一个N-末端染色质域和一个MRG结构域,无信号肽序列。
3.pET-50b-BmMOF的优化表达及其与家蚕MSL-3同源体重组蛋白的相互作用采用不同的培养基、IPTG浓度和温度对家蚕pET50b-BmMOF重组质粒的表达条件进行优化,得到具有高效且可溶的表达条件为:TB培养基,0.4 mM IPTG,25℃。
4.家蚕含CD域基因的序列分析与CD域的内含子的插入情况和进化分析大部分家蚕含染色质域基因的结构域与其它物种同源基因一样,除含有典型的CD域外,还都有其典型的所属家族的结构域,只有BmHP1γ为两个CD域,不含CSD域。