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钙是真核生物细胞内普遍存在的第二信使，在植物细胞中的各种环境和发育信号通路中起着至关重要的作用。在逆境条件下，类钙调磷酸酶B亚基蛋白CBLs可以感知和解码胞内Ca2+浓度的变化，通过调控并特异性结合蛋白激酶CIPKs，形成CBLs-CIPKs复合物，传递信号并诱导细胞对逆境胁迫做出反应。本实验室在前期研究中发现，过表达OsCBL5能增强水稻对NaCl的敏感性，表明OsCBL5在水稻中可能参与盐胁迫的负调控。 为了进一步明确水稻OsCBL5调节水稻耐盐性的分子机理，本研究主要开展以下实验内容: (1)利用最新的CRISPR/Cas9系统基因的编辑技术，构建水稻OsCBL5基因两个不同靶位点特异的Cas9/gRNA表达载体;再通过农杆菌介导的粳稻品种转化方法导入野生型ZH11中并获得转基因苗，共获得OsCBL5基因两个靶位点敲除的转基因苗共27株。 (2)根据CRISPR/Cas9系统编辑靶点的原理，利用PCR扩增、序列比对方法对转基因苗进行筛选，鉴定出4个OsCBL5基因敲除纯合突变株系。 (3)对获得的T0代OsCBL5基因敲除纯合株系进行农艺性状调查，发现敲除纯合株系与野生型相比，在株高、分蘖数、有效穗数、穗粒数、二次枝梗、剑叶宽度等性状上存在显著差异。 (4)对T0代OsCBL5基因敲除纯合株系进行耐盐性分析，与野生型相比，OsCBL5基因敲除纯合株系的耐盐性提高。 总之，本研究不仅有助于了解植物逆境胁迫下CBL/CIPK信号网络的机制，而且对水稻及其它作物的抗逆性遗传改良也具有重要的参考作用。