AP1等在哈萨克族食管癌组织及细胞株表观遗传调控中的表达研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yingchaoya
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目的:探讨c-Jun、c-Fos、Rad51、MMS22L以及XB130mRNA在食管癌鳞状细胞癌及远端无癌组织中的差异表达及相关性,探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂HDACi (TSA)以及甲基化转移酶抑制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza)是否参与了干预c-Fos等基因的表达调控,过表达EGFR信号通路的早期调控分子Lrigl基因,进一步探讨Lrigl对下游基因c-Jun、c-Fos、Rad51、MMS22L以及XB130mRNA是否存在调控作用及其可能的机制。方法:①利用RT-PCR技术,检测40例哈萨克族食管鳞癌组织及其对应的远端正常食管组织中c-Jun、c-Fos、Rad51、MMS22L以及XB130mRNA的表达情况,分析c-Jun等基因在癌组织和远端无癌组织,及癌组织中与临床病理指标之间的相关性;②通过在食管癌细胞株ECA109中细胞培养基加入HDAC抑制剂TSA和5-氮脱氧胞苷(5-aza),然后通过RT-PCR方法检测c-Jun、c-Fos、 Rad51、MMS22L以及XB130mRNA的表达情况;③以荧光蛋白标记的pEGFP-N1-Lrig1质粒转染ECA109细胞系,过表达Lrig1基因,用RT-PCR方法检测Lrigl过表达后食管癌细胞系ECA109中c-Jun、c-Fos、Rad51、MMS22L以及XB130mRNA的表达的变化。结果:①40例食管鳞癌组织与远端无癌食管组织中c-Fos在癌组织中的表达水高于远端无癌食管组织,有统计学意义(P<0.05);c-Jun、Rad51、 MMS22L mRNA在食管癌组织中略高于远端无癌组织,但差异无统计学意义(P>0.05);癌组织中c-Jun、c-Fos、MMS22L及Rad51mRNA与其他临床病理各指标之间均没有相关性。②c-Fos mRNA在TSA+5-aza实验组中的表达量与对照组相比有差别,有统计学意义(P<0.05);在5-aza与TSA+5-aza实验组中XB130mRNA的表达量与对照组相比有差别,有统计学意义(P<0.05);c-Jun、MMS22L mRNA在各实验组中表达量与对照组之间没有差别,无统计学意义(P>0.05)。③细胞转染结果显示,在食管癌细胞系ECA109中过表达Lrig1可在转录水平下调c-Fos、Rad51以及XB130的表达,而MMS22L的表达量与对照组相比有上升趋势;Lrig1过表达对c-Jun无影响。结论:c-Fos在食管癌组织中的表达高于远端无癌组织中的表达,说明它们可能参与了哈萨克族食管鳞癌的发生及进程;在食管癌细胞系ECA109中HDAC和去甲基化转移酶可能与c-Fos、Rad51以及XB130等基因的表达之间可能存在调控关系;在食管癌细胞系ECA109中过表达Lrig1可能通过某种机制下调c-Fos以及XB130的表达,可能存在调控关系;DNA损伤修复基因Rad51的表达降低,推测Lrig1作为癌基因抑制其表达,推进肿瘤的进程;MMS22L在食管癌细胞系ECA109中Lrigl过表达后均高表达,提示过表达的Lrigl可能促进癌基因MMS22L高表达。
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