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目的:通过检测甲状腺乳头状癌和癌旁正常甲状腺组织中BRAFV600E突变情况和ki-67蛋白的表达水平,探讨BRAFV600E突变和ki-67蛋白表达在甲状腺乳头状癌中的临床病理学意义及其对甲状腺乳头状癌患者诊断、治疗和预后的影响。方法:(1)选择甲状腺乳头状癌病例73例、癌旁正常甲状腺组织10例;以上病例均为10%福尔马林固定、石蜡包埋组织。(2)采用免疫组化Envision两步法分别检测各病例中ki-67表达情况;采用突变等位基因特异性扩增法(mutant allele-specific amplification PCR,MASA-PCR)检测各组织中BRAFV600E点突变。(3)收集73例甲状腺乳头状癌患者的临床病例资料,分析患者临床病理特点。(4)统计学方法采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,运用χ2检验,Spearman等级相关检验,Kappa一致性检测等分析BRAFV600E突变和ki-67蛋白表达在甲状腺乳头状癌中的表达关系及其临床病理学意义。结果:(1)癌旁正常甲状腺组织中ki-67不表达且无BRAFV600E突变;甲状腺乳头状癌中ki-67低表达,BRAFV600E突变率较高,提示BRAFV600E突变和ki-67蛋白表达,可能作为甲状腺乳头状癌诊断的指标。(2)甲状腺乳头状癌组织中ki-67蛋白的表达水平在肿瘤病灶较大者、肿瘤侵犯包膜者、发生淋巴结转移者和肿瘤发生在双侧甲状腺者较肿瘤病灶较小者、肿瘤未侵犯包膜者、未发生淋巴结转移者和肿瘤发生在单侧甲状腺者高BRAFV600E突变与肿瘤病灶大小、淋巴结转移的发生、包膜侵犯的发生和临床分期有关。提示ki-67蛋白表达和BRAFV600E突变与甲状腺乳头状癌发展、侵袭、转移有关。(3)甲状腺乳头状癌组织中BRAFV600E突变和ki-67蛋白表达之间存在相关关系(P<0.05),两者可能作为临床判断甲状腺乳头状癌患者预后的指标。(4)比较同组实验者采用免疫组织化学方法检测BRAFV600E突变的结果,两种检测方法有较好的一致程度。结论:(1)BRAFV600E突变与甲状腺乳头状癌的临床病理进展及不良预后有关,ki-67与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移能力密切相关;(2)甲状腺乳头状癌组织中BRAFV600E的突变和ki-67蛋白表达二者联合检测可以作为甲状腺乳头状癌诊断、治疗、预后的判断指标。