环境因子（温度、盐度、PH等）的改变不仅能够影响水生生物的呼吸和代谢，同时还可造成机体自由基代谢紊乱，若生物体长期处于应激状态会导致机体免疫防御能力下降，从而影响生物正常生长。研究水生生物抗氧化效应以及热休克蛋白对于探索其环境适应机制和提高机体抗氧化免疫能力具有重要意义。本试验是在光照强度1500lx，光周期为12L：12D、pH8.1的条件下，研究了温度和盐度对西藏拟溞（Daphniopsis tibetana Sars）的抗氧化酶及脂质过氧化作用的影响；同时，利用分子生物学手段研究了温度和盐度对西藏拟溞体内热休克蛋白70（HSP70）基因表达的规律，以此来探讨西藏拟溞对环境的耐受性机制。主要研究内容和结果如下：1.温度和盐度对西藏拟溞抗氧化酶及脂质过氧化作用的影响采用实验生态学的方法，研究了温度（T=16℃、19℃、22℃、25℃、28℃）、盐度（S=5、10、15、20、25）对西藏拟溞总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力以及脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量的影响。结果表明：温度和盐度因子能够诱导西藏拟溞抗氧化应激反应，胁迫24h后，SOD、GPX活性及MDA含量在28℃，盐度20时均达到最高值，分别为37.18±1.97U/mg﹒μg、75.1±9.96U/mg﹒μg、12.24±2.12nmol/mg·μg；48h后，高温低盐组（25~28℃、5~10）和高温高盐组（25~28℃、20~25）SOD、GPX活性及MDA含量显著高于其他处理组（P<0.05），在28℃，盐度5时均达到最大值，分别为19.25±3.48U/mg﹒μg、59.95±4.66U/mg﹒μg、4.98±0.66nmol/mg·μg；温度、盐度以及这两个因子之间对西藏拟溞体内SOD、GPX活性和MDA含量均有极显著影响（P<0.01）。2.温度和盐度对西藏拟溞热休克蛋白70基因表达的影响生物对温度和盐度变化后的生理反应能够反映出生物体对其环境的适应性及耐受能力。为了研究西藏拟溞对温度和盐度胁迫的生理反应，本试验利用SYBR Green荧光定量RT-PCR技术对温度和盐度处理后西藏拟溞hsp70mRNA表达量进行了定量分析，探讨西藏拟溞在应激反应中hsp70mRNA的表达规律。结果表明：温度和盐度的改变能够影响西藏拟溞体内hsp70的表达量。胁迫24h后，随着温度的升高，西藏拟溞体内hsp70的表达量呈先升高后降低再升高趋势，22℃和28℃显著高于其他处理组（P<0.05），在22℃，盐度为10时表达达到最高值7.60.72，是对照组（16℃，盐度15）的7倍。随着盐度的改变hsp70的表达量变化均有显著性变化（P<0.05）；胁迫48h后，西藏拟溞体内hsp70的表达量随着温度的升高而增加，各温度组hsp70的表达量均显著高于16℃时hsp70的表达（P<0.05），温度28℃，盐度20时达到高峰6.360.22，是对照组hsp70的表达量的6倍。随着胁迫时间的延长，高温组（25~28℃）以及高盐组（20~25）hsp70的表达量均显著增加。西藏拟溞热休克蛋白70的表达对不同变盐方向的响应都较为敏感。