OVCA1抑癌基因的克隆及其对卵巢癌细胞系A2780的生长抑制作用

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hunanlyq
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卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤,其发病率在女性生殖系统恶性肿瘤中为第三位,死亡率高居妇科之首。随着遗传学、分子生物学理论与技术的进步,人们已深刻地认识到,肿瘤应属于一种基因性疾病,常涉及癌基因和(或)抑癌基因异常。从基因水平对肿瘤进行深入研究并探讨相应的治疗方法,有可能从根本上解决肿瘤发生和发展的关键性问题,是目前国内外研究的热点。OVCA1 是近年来新发现的肿瘤抑制基因,该基因异常与乳腺、卵巢肿瘤关系密切。国外有研究表明OVCA1 基因能明显抑制卵巢癌细胞的生长;该基因在维持动物正常生长方面也有至关重要的作用。Nobukuni 等也对 OVCA1 的生物学功能作了初步的探讨,但对其详细的分子生物学功能仍然所知甚少。目前国内尚无相关研究。为了进一步探讨该基因对卵巢癌的抑制作用,本课题对 OVCA1 基因进行克隆并进一步观察了其对卵巢癌细胞系 A2780生长的影响。 方法 从正常人卵巢组织中提取总 RNA,用逆转录 PCR(RT-PCR)方法扩增编码 OVCA1 蛋白的片段;用分子克隆方法构建 OVCA1 重组质粒 pEGFP- OVCA1;脂质体转染法将 pEGFP-OVCA1 重组质粒转染卵巢癌细胞系 A2780,G-418 筛选稳定表达细胞株;MTT 法检测 OVCA1对 A2780 细胞增殖的影响;流式细胞仪分析 OVCA1 对细胞周期的影响。
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