基于羟基磷灰石/双膦酸盐/胶原蛋白可降解水凝胶的设计合成及在骨组织工程的应用

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hhl20020922
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骨作为一种天然的无机/有机复合材料,主要由羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HAP)等无机成分和胶原(collagen)等有机成分组成。HAP与collagen相互混杂组成的微观和宏观上的多级复杂结构,使骨具有了独特的机械性能。因此,模拟天然骨的形成机制,从仿生角度制备的在组成和结构上与天然骨相似的HAP/Collagen复合材料在促进骨再生方面得到越来越广泛的应用。其中,HAP作为骨的重要组成成分,具有生物相容性和骨诱导性;collagen具有良好的生物相容性和生物可降解性。HAP/Collagen复合材料则综合了这两者的优点。为了更好地促进骨修复,我们在HAP/Collagen复合材料中引入抗代谢骨病药物阿仑膦酸钠(Alendronate,ALN)。阿仑膦酸钠能够抑制破骨细胞的骨吸收,同时还可以促进成骨细胞的骨形成。目前,用于骨替代材料的HAP/Collagen复合材料大多通过将HAP颗粒和collagen简单物理混合而得到,所得产品材质不够均匀,强度较低,与天然骨的性能结构相差甚远。而将表面修饰有ALN的HAP与collagen通过化学交联的方法制备的复合材料极大的改善了材料的机械性能。通过化学交联形成的水凝胶网络体系中充斥大量的水分,具有较高的弹性模量和良好的生物相容性。同时,引入的ALN和HAP具有抗骨吸收作用并促进成骨细胞的生长分化等生物活性,可诱导骨修复再生。  论文第一章选择性的阐述了无机类骨修复材料、天然高分子骨修复材料和无机/天然高分子骨修复复合材料,以及双膦酸盐类药物的研究现状。  论文第二章研究了ALN修饰的HAP和胶原蛋白-甲基丙烯酸酐(collagen-MA)在水溶性氧化还原引发剂过硫酸铵/N,N,N,N-四甲基乙二胺(APS/TEMED)的作用下合成水凝胶的制备工艺,并对所制备的水凝胶对骨的修复效果进行考察。本文选择了两种水凝胶的制备方式,一种是由collagen-MA和阿仑膦酸钠-甲基丙烯酸酐(alendronate-methacrylic anhydride,ALN-MA)修饰的纳米羟基磷灰石(HAP-ALN-MA)以不同比例制备Collagen/HAP-ALN水凝胶,另外一种制备方式是collagen-MA、HAP和ALN-MA三组分以不同比例制备Collagen/HAP/ALN水凝胶,并分别在细胞水平和小动物水平(大鼠股骨缺损模型)上考察了水凝胶的骨修复效果。其中在Collagen/HAP-ALN水凝胶中,HAP表面引入ALN-MA量可高达4.1 wt.%,引入ALN-MA不仅提高了HAP颗粒在水中的分散性,同时ALN-MA末端的双键也为APS/TEMED的交联反应提供反应点。通过氢核磁共振谱(1H NMR)、热重分析(TGA)、X射线衍射(XRD)以及傅立叶转换红外光谱(FT-IR)对HAP-ALN-MA进行了表征。动物实验研究初步表明Collagen/HAP-ALN水凝胶和Collagen/HAP/ALN水凝胶具有较好的骨修复效果,且组织学分析图片中可发现较多的水凝胶诱导产生的新生骨组织。  论文第三章研究了基于ALN修饰的HAP和collagen在交联剂京尼平(GNP)的作用下合成水凝胶的制备工艺并及对其骨修复效果进行考察。该复合材料通过引进天然交联剂GNP将HAP-ALN与collagen末端的氨基通过化学作用交联形成Collagen/HAP-ALN水凝胶,其毒性远低于戊二醛等常用的化学交联剂,但是交联的时间延长。本文设计合成了Collagen/HAP-ALN(19.8 wt.%)和Collagen/HAP-ALN(13.3 wt.%)两种比例的水凝胶并且在细胞水平上考察了HAP/Collagen水凝胶的骨修复效果。同时以Collagen水凝胶作为对照。MC3T3-E1细胞培养实验初步表明Collagen/HAP-ALN水凝胶能明显的促进成骨细胞的增殖,而且HAP的引入能明显的促使MC3T3-E1细胞保持成骨形态,具有一定的取向。
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