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目的初步探讨miR-155是否可通过调节CXCR4的表达并影响下游PI3K/AKT途径的活化水平来调控滋养细胞的侵袭、迁移功能,从而研究miR-155参与子痫前期发生、发展具体的分子机制。材料和方法1实验材料本研究选用人绒毛膜癌细胞系JEG-3细胞株,其生物学性状接近于原代分离的滋养细胞,且该细胞系的侵袭力与早孕期滋养细胞无显著性差异。2实验方法设计miR-155 mimics和miR-155 inhibitor,对JEG-3细胞进行转染,通过Transwell侵袭实验、划痕实验,观察转染后细胞的侵袭和迁移能力的变化;利用Real-time PCR检测CXCR4 m RNA的表达;利用Western blot检测CXCR4及下游p-AKT蛋白的表达水平。3统计学方法本研究中所有数据均采用SPSS21.0版本软件进行统计学分析处理,实验结果以x±s的方式表示。两组间比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。以α=0.05为检验水准。结果1转染miR-155后JEG-3细胞内CXCR4 m RNA表达的变化情况Real-time PCR结果显示,miR-155 mimics转染组CXCR4 m RNA相对表达量(0.589±0.096)明显低于空白对照组(1.503±0.090)和阴性对照组(1.146±0.153),差异有统计学意义(F=36.59,P=0.035);miR-155 inhibitor转染组CXCR4 m RNA相对表达量(1.739±0.083)与两组对照组相比差异也有统计学意义(F=28.34,P=0.027)。2转染miR-155后JEG-3细胞内CXCR4及其下游关键因子p-AKT蛋白的表达情况Western blot结果显示miR-155 mimics转染组CXCR4蛋白和下游p-AKT蛋白表达水平均明显降低,与空白对照组和阴性对照组相比差异均有统计学意(F=126.67,P=0.000;F=114.83,P=0.000);而miR-155 inhibitor转染组CXCR4和p-AKT蛋白水平则升高,与空白对照组和阴性对照组相比差异均有统计学意(F=16.85,P=0.002;F=14.72,P=0.003)。3转染miR-155后JEG-3细胞侵袭能力的变化情况Transwell侵袭实验结果显示,与空白对照组(63.46±2.37)和阴性对照组(49.29±5.81)侵袭细胞数相比,miR-155 mimics转染组侵袭细胞数(22.89±9.42)明显减少,差异有统计学意义(F=127.37,P=0.000);同时,miR-155 inhibitor转染组侵袭细胞数(81.50±11.25)明显升高,差异有统计学意义(F=2.94,P=0.027)。4转染miR-155后JEG-3细胞迁移能力的变化情况划痕实验结果显示,转染miR-155 mimics后,JEG-3细胞相对迁移距离(0.159±0.058)低于空白对照组(1.080±0.045)和阴性对照组(0.823±0.201),差异有统计学意义(F=29.600,P=0.017);而miR-155 inhibitor转染组,JEG-3细胞相对迁移距离(1.640±0.078)明显增加,差异有统计学意义(F=16.103,P=0.024)。结论miR-155可能通过抑制CXCR4的表达进而抑制其下游PI3K/AKT信号通路的活化,从而影响滋养细胞的侵袭及迁移能力,在子痫前期的发生发展中发挥重要作用。